曲子宫绦虫染色标本的制作和生殖器官观察.pdfVIP

中国草食动物科学 2017年 doi：10．3969／j．issn．2095—3887．2017．02．014 曲子宫绦虫染色标本的制作和生殖器官观察 杨讳程-，张国权1，张元来2，刘立军1，张亮1，田启会1，张进隆1 摘要：为了研究曲子宫绦虫的形态结构和生殖器官的变化规律，用H．E染色法制作曲子宫绦虫的染 色标本，对传统的染色方法进行了改进，制作出结构清晰、颜色鲜艳的曲子宫绦虫标本，在光学显微 镜下观察到该绦虫成节中雌雄生殖系统、排泄系统以及孕节中的子宫和虫卵结构。该研究可为该曲 子宫绦虫形态学虫种鉴定和生殖器官变化规律增添新资料，为本病的确诊提供参考依据。 关键词：曲子宫绦虫；生殖器官；苏木素染色 中图分类号：S852．7 文献标志码：A 曲子宫绦虫隶属于扁形动物门绦虫纲，多节绦虫亚 1．3方法 纲，圆叶目，裸头科，该属绦虫为大型绦虫，体长可达4．3m， 1．3．1虫体的处理将采集的绵羊绦虫先用自来水冲洗 常寄生于绵羊、山羊、黄牛、牦牛等反刍动物的小肠中。 3次，再用生理盐水漂洗浸泡，后将完整的虫体从头节开 一条完整的绦虫由头节、颈节和体节3部分组成，生殖系 始剪成2cm左右的小段，依次按1—1、1—2、l一3…的编号 统和排泄系统是曲子宫绦虫比较重要的结构“。关于莫 方法编号，将样品分别用70％乙醇固定，用于制片。 尼茨绦虫的形态学研究和染色方法报道很多，但对曲子 1．3．2绦虫染色标本制作将选取的绦虫节段压入两洁 宫绦虫形态学的研究和染色方法的研究报道很少。本实 净的载玻片中间，为了不使虫体压得过薄，可在载玻片两 验以甘肃省天祝地区高山细毛羊小肠中采集到的曲子 端垫以适当厚度的纸片，用线绳扎紧载玻片两端，投入 宫绦虫为材料，采用H．E染色法制作曲子宫绦虫的染色 70％酒精中固定24—48h，然后用苏木素一伊红(H．E染色 标本，对传统的染色方法做了改进，制作了结构清晰、颜 法)染色法染色。具体步骤：①酒精洗脱：将压片固定好的 色鲜亮、不易褪色的曲子宫绦虫的染色标本。在光学显 虫体投入梯度酒精中，50％酒精，lomin_30％酒精，lo 微镜下观察到该绦虫幼节中可见排泄系统和萌芽状态 min一蒸馏水，10min；②染色：苏木素染色液30min一用 的生殖系统；成节中发育完成的雌雄生殖系统和排泄系 蒸馏水漂洗10min；③分色：用l％盐酸溶液分化10～20s； 统；孕节中子宫和虫卵的结构。该研究可为该虫体在形 ④染色：水伊红染液10min；⑤脱水：80％酒精，5min一 态学虫种鉴定和生殖器官变化规律增添新资料，为本病 90％酒精，10 的确诊提供参考依据。 1材料与方法 苯，10min；⑦封固：加拿大树胶封固。 1．1虫种 1．3．3实验用绦虫染色标本的制作将1．3．2中得到的染 实验用曲子宫绦虫采自甘肃省天祝县牛羊定点屠宰 色标本在光学显微镜下观察，根据其形态特征，确定所 场1岁龄高山细毛羊的小肠中： 采得的绦虫的种类，确定曲子宫绦虫对应的编号，将所 1．2试剂和仪器 有曲子宫绦虫从头节至孕节的样品用H．E染色法制作 苏木素精，酒精，铵明矾，甘油，甲醇，二甲苯，加拿大树 染色标本。 胶，载玻片，盖玻片，0lympus光学显微镜照相系统，等等。 2结果 2．1曲子宫绦虫寄生部位 收稿日期：2016一12—25 基金项目：2016年院列科研项目(2016GMGY002) 曲子宫绦虫寄生于高山细毛羊空肠前段的小肠黏膜 作者简介：杨袢程(1985一)，男．硕士，主要从事动物解剖生理教学与研究工作。 通信作者：张进隆(