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遗传学实验 果蝇的二因子 自由组合实验 （一）实验材料 黑腹果蝇的纯系野生型黑体长翅、突变型灰体残翅： 黑体突变型（用b表示），残体突变型（用vg表示）。 （二）实验器具 双筒解剖镜；大指管；麻醉瓶，磁板，海棉板；解剖针；毛笔；镊子。 （三）药品试剂 乙醚；玉米粉；琼脂；蔗糖；酵母粉；丙酸。 实验方法 收集雌果蝇品系的处女蝇。 准备好培养基，把已麻醉的残翅♀、♂果蝇和黑檀体♀、♂果蝇，按正、反交方式，分别放入不同培养瓶内，进行杂交，贴好标签。 6－7天后，见到有F2幼虫出现，可除去亲本（除干净）。 再过3－4天，检查F1成蝇性状，应该是灰体、长翅（正、反相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇；地F1幼虫出现后亲本未倒干净；杂交时雄蝇选择有误；以及亲本原种不纯等等。. 按原来的正、反交各选5－6对F1成蝇（♀、♂），换新的培养瓶，继续饲养（此时不需要处女蝇）。 6－7天后，除去F1亲本。再过3－4天，F2代成蝇出现，麻醉后（可以深麻醉）倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计6－7天（当F3出现就失去意义了）。 实验方法 杂交及测交示意图 P ? vgvg++(♀)? ?× ++ee(♂) ? (纯合灰体残翅处女蝇)（纯合黑体长翅雄蝇） ??????????????? F1????????? +vg+e（灰体长翅） ♀♂相互交配，无须处女蝇 F2 ????灰体长翅：灰体残翅：黑体长翅：黑体残翅=9：3：3：1 ?????? [+][+]?????? [+][vg]????? [b][+]??????? [b][vg] 测交：? ?????+vg+e(♀)??×??? ++ee(♂) ? (杂合灰体残翅处女蝇) ??????（纯合黑体长翅雄蝇） ???????????????? ????????????? 测交后代：灰体长翅：灰体残翅：黑体长翅：黑体残翅=1：1：1：1 1.2.8????????? ? 作 业 总结二因子自由组合的遗传特点。 如果统计测验结果与预期的不相符合，试分析可能的原因。 * 实 验 目 的 掌握果蝇性别鉴定技术以及麻醉、杂交等方法；验证孟德尔第二定律。 实验原理 位于非同染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的。因为根据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对（或另几对）基因的分离是独立的，所以一对基因所决定的性状在杂种第二代是3：1之比，而两对不相互连锁的基因所决定的性状，在杂种第二代就呈9：3：3：1。本实验通过培养果蝇的亲代、F1及F2代，来观察统计果蝇长翅和残翅、体色为灰色和黑色这两对相对性状的表型数量，然后经过计算求出这对相对性状的表型数量分离比，从而验证自由组合定律。 实验材料、器具与试剂 黑体长翅 灰体残翅 结果及分析 ? F2（正反交合瓶统计）果蝇数目表 合计 残黑 残灰 长黑 长灰 子代类型 统计日期 ? 2. 测交数据统计及结果分析 ? 　　　? 结果及分析 ? 合计 残黑 残灰 长黑 长灰 子代类型 统计日期 （O－C）2/C 偏差（O－C） 预期数（9：3：3：1）（c） 实验观察数（O） 合计 残黑 残灰 长黑 长灰 ? 自由度＝n—1=4—1=3 X2=∑（O－C）2/C P所在范围，即查表可得P值。 X2测验及结果分析 结果及分析 ? *