免疫抑制法测定肝脏病血清m-AST的临床意义.docVIP

免疫抑制法测定肝脏病血清m-AST的临床意义 杨九华 黄颖① 摘要 目的 观察免疫抑制法测定血清m-AST活力在肝脏病中的临床意义。方法 采用m-AST免疫抑制法测定试剂盒对90例正常人及107例不同肝脏病者血清m-AST进行测定。结果 正常值为10.1±2.35(6.4-15.3)u/L，认定正常参考上限为17u/L。急性肝炎、慢性肝炎、肝硬变、原发性肝癌入院时m-AST分别为45.0±47.3、52.0±46.8、41.7±13.5、29.2±36.3u/L；第二周分别为7.8±5.5、32.3±34.2、48.9±15.4u/L。入院时m-AST升高比分别为73.0%、75.7%、54.5%、70.0%；第二周分别为15%、72.3%、49.7%；入院时m-AST/AST分别为0.7±0.4、0.6±4.7、0.5±6.7、0.4±4.2。入院时急性肝炎m-AST与AST比值明显低于其它组，而肝硬变m-AST升高者的比例明显低于其它组。二周后急性肝炎m-AST有明显下降，而其它组则改变不明显。结论 免疫抑制法测定试剂盒于全自动生化分析仪上测定m-AST，操作简便快速，结果准确，可大批量检测，便于常规开展。在肝脏病中，血清m-AST活性测定有助于肝细胞破坏的评估，其与总AST的比值有助于急性肝炎的预后判定及急、慢性肝炎的鉴别。 关键词 天门冬氨酸氨基转移酶/线粒体 免疫抑制法 肝脏病 临床上，同工酶的测定往往比总活力的测定更具有价值。天门冬氨酸氨基转移酶（aspartrate aminouansferase，AST），属细胞内功能酶，细胞外液含量极低。存在人体组织细胞内有两种同工酶，其一存在于胞浆内（c-AST），另一存在于线粒体内（m-AST）。这两种成份的升高有着不同的临床意义。前者升高表示细胞膜通透性改变，而后者则表示线粒体膜的通透性改变和细胞的坏死。血清中m-AST活性的检测是协助判定细胞坏死的良好指标。但以往m-AST的测定方法繁琐，结果误差大，临床开展困难。而免疫抑制法可直接上机操作，适用日常临床生化检验。本文采用免疫抑制法上机试剂盒对150例不同肝病病人血清m-AST进行了观察，报告如下。 材料和方法 一、对象150例住院病人，男72例，女35例，年龄18-71岁，平均34岁。均经临床、生化、B超、CT确诊为急性肝炎33例、慢性肝炎24例、肝硬变32例，肝癌18例，留取入院及第二周血清检测。正常系义务献血者血清90份，男51例，女39例，年龄22-47岁，平均31岁。 二、试剂：m-AST免疫抑制法测定试剂盒（上海北加生化试剂有限公司） 三、仪器：CL-7300全自动生化分析仪（日本岛津） 四、原理与方法： 1、原理：试剂中的免疫抗人多克隆c-AST抗体，与样本中的c-AST结合形成免疫复合物，使c-AST活力被抑制，而m-AST活力不受影响，此时检测结果为m-AST活力。 2、方法：免疫抑制法测定按试剂盒说明书进行检测，根据本实验室条件作适当修改。 ① 作者单位：安徽医科大学附属医院检验科，合肥市 230022 分析参数：速率法；样本20uL，试剂一200uL，试剂二20ul；第一波长340nm，第二波长410nm；检测时间3分钟。 结果 正常组90例，m-AST参考值为10.1±2.35(6.4-15.3)u/L，如X±3SD则可以认定正常参考上限为17u/L。不同肝脏疾病患者血清检测结果见表1。入院时急性肝炎m-AST与AST比值明显低于其它组，而肝硬变m-AST升高者的比例明显低于其它组。二周后急性肝炎m-AST有明显下降，而其它组则改变不明显。 表1 肝脏疾病m-AST检测结果[（xˉ ±s）u/L] 项目 急性肝炎 慢性肝炎 肝硬变 原发性肝癌 n 33 24 32 18 入院时m-AST 45.0±47.3 52.0±46.8 41.7±13.5 29.2±36.3 第二周m-AST 7.8±5.5 32.3±34.2 48.9±15.4 入院时m-AST升高比（%） 73.0 75.7 54.5* 70.0 第二周m-AST升高比（%） 15* 72.3 49.7 入院时m-AST/AST 0.7±0.4* 0.6±4.7 0.5±6.7 0.4±4.2 *p0.05 讨论 AST同工酶测定早期采用的电泳法，变异较大，灵敏度差。其改进方法，精密度、灵敏度等方面均较好，但大批标本的检测有困难。离子交换树脂法操作繁琐；比色法受多种因素影响，特异性差；而免疫抑制法则因其简便特异，重复性好，诊断价值高，而愈来愈受到临床检验工作者的青睐。本文采用免疫抑制法测定试剂盒于全自动生化分析仪上测定，操作简便快速，结果准确，可大批量检测，适用日常临床生化检验。 横纹肌、心肌和