制药工程作业：比较转基因动物及转基因植物的技术原理及方法.docVIP

比较转基因动物和转基因植物的技术原理和方法 生物工程1班 1 转基因动物：如果动物所有的细胞均整合有外源基因，则具有将外源基因遗传给子孙后代的能力，通常把这类动物称为转基因动物。 1.1 转基因动物的原理 转基因动物的基本原理是将改建后的目的基因（或基因片段）用显微注射法等方法注入试验动物的受精卵（或着床前的胚胎细胞），然后将此受精卵（或着床前的胚胎细胞）再植入受体动物的输卵管（或子宫中）使其发育成携带有外源基因 的转基因动物，人们可以通过分析转基因和动物表型的关系，从而揭示外源基因的功能：也可以通过转入外源基因培育品种优良的工程动物等。 1.2 转基因动物的方法 转基因动物技术包括显微注射法，逆转录病毒法，胚胎干细胞法和精子载体法等。 ①显微注射技术 显微技术是采用显微注射仪对受精卵进行注射的一种技术，其主要仪器部分包括倒置显微镜和微操纵臂，附属设备主要包括拉针仪等。 ②逆转录病毒载体技术 利用逆转录病毒载体进行基因转移，一般是将去掉透明带的早期胚胎（8细胞胚胎）和可产生病毒的成纤维细胞共培养，感染一定时间，再移植给养母完成发育过程。 ③胚胎干细胞技术（ES细胞）技术 ④精子载体技术 2 转基因植物技术原理和方法 2.1 原理 植物转基因技术的内容包括：目的基因的分离和鉴定，植物表达载体的构建，植物细胞的遗传转化，转化细胞的筛选，转基因植物的鉴定以及外源基因的表达检测。理论上，植物转基因技术和常规的杂交育种方法都是通过优良基因的重组获得新品种，但传统的常规杂交育种是通过植物种内或近缘种间的杂交将优良性状组合在一起，是植物获得新性状，其基因交流的范围有限，而且育种效率低。植物转基因技术是利用重组DNA的方法直接将目的基因导入到植物细胞中，并在其中进行表达，从而创造新品种，它克服了植物有性杂交的限制，基因交流的范围无限扩大，可将病毒，细菌，远缘植物，动物，人类甚至人工合成的基因导入植物，可以认为地有目的地组合基因，改变生物的遗传性能，而且育种效率快，所以应用前景非常广阔。 2.2 基本方法 ①农杆菌介导法，包括共培养法，叶圆盘法，活体接种法 ②DNA直接导入法（无载体介导转化法），包括圆球体法，脂质体法，聚乙二醇法，电击法(电穿孔法），显微注射法，激光微束法，基因枪法，离子束介导法和超声波法。 ③花粉管通道法 ④植物病毒介导法。 大多数转基因植物是通过农杆菌介导法和基因枪法这两种方法获得的。