液相色谱实验操作.pptVIP

色 谱 分 析 叶存玲 yecunling2003@126.com * 本课程参考的教材有： （1）气相色谱方法及应用 刘虎威 编著 （第二版） 化学工业出版社 （2）高效液相色谱方法及应用 于世林 编著 （第二版） 化学工业出版社 （3）色谱柱技术 刘国诠、余兆楼 化学工业出版社 ◆色谱的起源： 1901年俄国植物学家茨维特（M. S. Tswett）发现。 “Physicochemical structure of the chlorophyll grain, experimental and critical study” 硕士论文 写道：“I could vividly see differently colored rings when filtering petroleum ether extracts of leaves through Swedish paper” 1903 年 茨维特 chromatography 1917年 茨维特 诺贝尔化学奖的候选人 英国人马丁（A. J. P. Martin）和辛格（R. L. M. Synge）证实了气体作为色谱流动相的可行性，并预言了气相色谱的诞生。 20世纪40年代 1952年 马丁和辛格发表了第一篇GC论文。 同年获得了诺贝尔化学奖。 1955年 第一台商品GC仪器问世。 1958年 毛细管GC柱问世（Golay）。 GC从实验室的研究技术变成了常规分析手段。 20世纪60年代末 微粒固定相的研制成功以及制造了高压输液泵和高灵敏度检测器，HPLC获得新生。 ◆气相色谱与液相色谱的比较： 气相色谱仪（GC） 高效液相色谱仪（HPLC） 1. 结构图 气相色谱仪 高效液相色谱仪 2. 流动相 GC：种类少（氦气、氮气、氢气）。 HPLC：种类多，且对分离结果的贡献很大。 作用：是将样品年带入GC系统进行分离， 其本身对分离结果的影响很有限。 3. 固定相 GC：种类多。 LC：十几种。主要靠选用不同的流动相来改变 分离选择性。 注： 在实际分析中，GC一般是选定一种载气，然后通过改变色谱柱（固定相）以及操作参数（柱温和载气流速）来优化分离；而LC则是选定色谱柱后，通过改变流动相的种类和组成以及操作参数（柱温和流动相流速）来优化分离。 4. 分析对象 GC：可挥发，热稳定，沸点一般不超过500 OC。 20-25% LC：其余原则上都可用LC分析。 注：永久性气体用GC分析。 5. 检测器 GC：热导检测器（TCD）、火焰离子化检测器（FID）、 电子俘获检测器（ECD）、氮磷检测器（NPD）等。 LC：紫外-可见检测器（UV-Vis）、示差折光检测器（RI）、荧光检测器和电化学检测器。 5.制备分离 GC在制备分离上，适用价值很有限； LC在制备分离上，有很广泛的应用。 ◆色谱文献 1.Analytical Chemistry 2.Journal of Chromatography A 3.Journal of Chromatography B 4. Journal of Separation Science 6.Chromatographia 7. Journal of Chromatographic Science 8. Analytical and Bioanalytical Chemistry 9. The Analyst 10. Trend in Analytical Chemistry 11. Analytica Chimica Acta 12. Journal of Analytical and Applied Pyrolysis 13. Environmental Science and Technology 14. Biomedical Chromatography 15. Journal of Analytical Chemistry 16. 分析化学（日） 17. 分析化学 18.色谱 19. 高等化学学报 http://www. sepu. net http://www. instrument. com. cn /paal(北京大学色谱组) /indexCN.php(中科院大连化物所) （中科院兰州化物所色谱中心） ■ HPLC实验操作过程： 一.液相色谱仪器对流动相的要求 1.与检测器匹配 2.脱气 3.避免用含卤素离子的缓冲盐（不锈钢系统） 4.溶剂的粘度 5