复合侵染的蚕豆黄花叶病病原诊断.pdfVIP

第 25 卷 第 2 期 电　子 　显 　微 　学 　报 Vol25 ,No2 2006 年 4 月 Journal of Chinese Electron Microscopy Society 200604 ( ) 文章编号 2006 复合侵染的蚕豆黄花叶病病原诊断 1 2 1 1 谢 　礼 ,刘文洪 ,洪 　健 ,周雪平 ( 1 浙江大学生物技术研究所 ,浙江 杭州 310029 ;2 浙江中医学院 ,浙江 杭州 310053) 摘 　要 : 应用透射电镜 、ELISA 和 RTPCR 技术对浙江丽水的蚕豆黄化花叶病株进行了病原诊断 , 电镜负染色发现 病株汁液中存在线状和球状两种病毒粒子 ,线状粒子长度在 600nm～800nm 的占73 % ,球状粒子直径约 26nm ;超薄 切片观察到细胞质中存在 Ⅱ型风轮状内含体及大量电子致密无定型体 ,还有线粒体增生聚集和膜结构的增生 ,两 类细胞病变现象出现在相邻细胞中;用 BBWV 2 的单克隆抗体对病汁液 ELISA 检测结果为阳性反应 ;用 Potyvirus 通 ( ) 用引物进行 RTPCR 检测有 17kb 特异性扩增片段产生 。根据以上结果诊断病原为蚕豆萎焉病毒 2 BBWV 2 和菜 ( ) 豆黄花叶病毒 BYMV ,二者为复合侵染 。 关键词 : 蚕豆 ;蚕豆萎蔫病毒 2 ;菜豆黄花叶病毒 ;病原诊断 中图分类号 : S43112 ;S43241 ;Q336 　　文献标识码 : A ( ) ( ) 　　发生在我国侵染蚕豆 Vicia f aba L 的病毒病 后 ,铜网蘸取组织汁液 ,用 2 %磷钨酸 p H67 负染 原已报道 9 种 ,分别是 :蚕豆萎蔫病毒 2 (BBWV 2) 、 色 , 在 J EM1230 型透射 电镜下观察 , Gatan792 型 ( ) ( ) 蚕豆杂色病毒 BBSV 、芜菁花叶病毒 TuMV 、大豆 CCD 记录图像 。 ( ) ( ) 花叶病毒 SMV 、菜豆黄花叶病毒 BYMV 、黄瓜花 12 　病毒粒子形态统计 ( ) ( ) 病毒粒子的负染色图像用捷达公司JD801 形 叶病毒 CMV 、菜豆卷叶病毒 BLRV 和蚕豆真花叶 ( ) [ 1 ,2 ] 态学图像分析软件进行线状粒子长度和球状粒子直 病毒 BBTMV 。田间症状主要表现为褪绿花叶 型 ,萎蔫坏死型和黄化卷叶型三类 。当两种或两种 径测量 ,分别统计 100 个病毒粒子 。 以上病毒复合侵染时症状表现更为复杂 ,仅