08第八章 微生物的生态要点.ppt

土壤中的细菌 自养菌：只需要简单的无机化合物作为养料来维持生命。如硝化细菌、硫细菌和铁细菌等； 腐生菌：不能利用CO2或碳酸盐作为碳源，主要是分解有机物获得能量有些可利用无机氮，有些则利用有机氮，如氨化细菌、尿素细菌、纤维素分解细菌和固氮菌属等； 致病菌：一般在土壤中容易死亡，只有能形成芽孢的细菌才能长期存在，如炭疽杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌等。 土壤中的放线菌 放线菌的数量也很大，仅次于细菌，占土壤中微生物总数量的5-30%。数量虽少，但在土壤中的生物量，相近于细菌。常见的有链霉菌属、诺卡氏菌属、小单孢菌属和高温放线菌属 土壤中的真菌 从数量上看，真菌是土壤微生物中第三大类。多属于藻菌纲、子囊菌纲、半知菌纲 土壤中其他微生物 土壤中有许多藻类，大多数是单细胞的硅藻和绿藻。 土壤中的原生动物，包括纤毛虫、鞭毛虫和肉足虫等。 土壤中的噬菌体，能裂解相应的细菌。 土壤中有肠道病毒。 土壤微生物的分布 土壤微生物的分布与土壤的结构、有机物和无机物的成分、含水量及土壤理化特性不同而有差异。此外，与施肥、耕作方法、气象条件、植被覆盖等也有密切关系。 2. 土壤微生物的分离与计数 1）.培养基的制备:向高氏一号培养基中加入10%酚溶液，10滴/100ml培养基；土豆蔗糖固体培养基中加入链霉素，30μg/ml；三种培养基各置备9个平板，标记。每个平板上加入0.2ml相应的土样稀释液。 牛肉膏蛋白胨：（10-6） 10-7 ，10-8各2个； 高氏一号：（10-4）10-5，10-6，各2个； 土豆蔗糖： 10-3，10-4（10-5），各2个； 2）.土样的稀释：称取土样2g， 放入盛18ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，置摇床振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液（10-2） ，静置3-5分钟。用1ml的无菌吸头从中吸取1ml土壤悬液，注入事先分装有9ml无菌水的试管中，吹吸3次，振荡均匀（10-3）。然后同样方法，配置成稀释度为10-4，10-5，10-6 ，10-7 ，10-8的土壤溶液； 用一支新的无菌吸头，分别由各浓度土壤稀释液中各吸取200ul，对号较均匀地放入已标记好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上，用无菌玻璃涂棒涂匀。 3）.培养： 牛肉蛋白胨平板倒置于37℃，48hr 高氏一号，倒置于30℃，5-7天； 土豆蔗糖，倒置于30℃，3-5天； 4）.菌落计数： 培养结束后，根据不同类群的微生物的菌落特征，分别在不同的培养基平板上统计相关类群的微生物菌落，每种培养基上只记一种微生物的菌落。 由下式计算菌落形成单位： 实验结果与讨论： 1.土壤样品中细菌、放线菌、霉菌的菌落形成单位（cfu） 3. 土壤的卫生微生物学检测 细菌总数的测定 大肠菌群值的测定 产气荚膜杆菌的测定 嗜热菌的测定 芽孢菌和非芽孢菌的比值测定 自然界中存在许多自然和人工的高温环境 嗜酸菌 嗜碱菌 嗜盐菌 第二节 微生物个体的生态条件 抗生素的抑菌或杀菌机制主要可分为： 1）抑制细菌细胞壁合成，细胞壁缺损细菌在低渗条件下常因细胞吸水过多破裂而死亡，而对人和动物无毒害作用，因人和动物不具有细胞壁，如青霉素、头孢菌素、杆菌肽等。 2)破坏细胞膜的通透性。主要通过下面 3 种途径：①多肽类抗生素，如多粘菌素E，能降低细菌细胞膜表面张力，因而改变了细胞膜的通透性，甚至破坏膜的结构，结果使氨基酸、单糖、核苷酸、无机盐离子等外漏，影响细胞正常代谢，致使细菌死亡。②多烯类抗生素，如制霉菌素与固醇具有亲和力，因此能与微生物的膜（含固醇物质）结合后形成膜- 多烯化合物，引起细胞膜的通透性能改变，导致胞内代谢物的泄漏。这类抗生素对真菌细胞膜起作用，而对细菌不起作用，因细菌细胞膜不含固醇类物质。③离子载体类抗生素，这类抗生素是脂溶性的，能结合并运载特定阳离子通过双脂层膜。如缬氨霉素、短杆菌肽A 等能增加线粒体膜对H+、K+或 Na+的通透性，为维持线粒体内正常的K+浓度就必须使泵入K+的速度与流出速度平衡，这样使得线粒体消耗能量用于泵入K+，而不是用来形成ATP，因此抑制了氧化磷酸化作用，从而起杀菌作用。 3）抑制蛋白质的合成。能抑制蛋白质合成的抗生素很多，其作用机理也较复杂，主要有下面 4 个方面：①抑制氨酰-tRNA 的形成。如吲哚霉素的抑菌作用是在氨基酸活化反应中和色氨酸竞争与色氨酸激活酶结合，从而抑制氨酰-tRNA的形成。②抑制蛋白质合成的起始。如链霉素、庆大霉素等能抑制 70S合成起始复合体的形成以及引起 N-甲酰-甲硫氨酰-tRNA从70S合成起始复合体上的解离，因此阻碍蛋白质合成的起始。③抑制肽链的延长。如四环素族抗生素由于能封闭 30S 亚基上的 A 部位使氨酰- tRNA 的反密码子不再