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TG1ChemicallyCompetentCell产品说明书

TG1 Chemically Competent Cell 产品说明书 ● 产品规格 TG1 Competent Cell 100μl /支 pUC19 (control vector, 10pg/μl) 10μl 保存条件: -80℃ ● 基因型 q – – [F´traD36 proAB lacI ZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB) Δ(mcrB-hsdSM)5(rK mK ) ● 产品说明 TG1 来源于E. coli K-12 菌株,是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃,7 h 可见克隆。 主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15 的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实 验;但不含核酸酶endA 1 突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去 除菌体内大量的核酸酶。TG1 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率109 cfu/μg DNA 。 ● 操作方法 1. TG1 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物)并用 手拨打EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25 分钟。 2. 42℃水浴热激45 秒,迅速放回冰上并静置2 分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或LB),混匀后37℃,200 rpm 复苏60 分钟。 4. 5000 rpm 离心1 分钟收菌,留取100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB 培 养基上。 5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。 ● 注意事项 1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8 分钟内加入目标DNA ,不可在冰中放置时间过长,长时间存放 会降低转化效率。 2. 混入目的DNA 时应轻柔操作。 3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

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