端粒酶—肿瘤治疗研究新方向周冰峰龙妮娅.pptVIP

 “染色体是如何被端粒和端粒酶保护的” Elizabeth H. Blackburn Carol W. Greider Jack W. Szostak 端粒酶的作用机制 TERT在端粒酶中的地位 　 　 正常组织广泛表达hTR和hTP1，而hTERT的表达被抑制，大多数端粒酶阳性的肿瘤细胞和永生化细胞系中均表达hTERT； 这说明hTERT的表达与端粒酶活性是平行的，所以在端粒酶的激活过程中hTERT在细胞中的作用是决定端粒酶活性的关键。 端粒酶活性检测技术 端粒酶的常用检测方法有三种： 1）端粒重复序列扩增法（TRAP) 2）RT-PCR法检测hTERT的表达 3）用32P标记的端粒（CCCTAA）探针或用Hinf1和Ras1酶解的基因组DNA杂交 端粒酶在肿瘤治疗中的应用 目前主要的途径有以下几种： （一）阻断端粒酶RNA的模板作用，包括：反义hTR、反义寡核苷酸、锤头状核酶和肽苷酸等； （二）针对端粒酶催化亚基的抑制剂：反义hTERT抑制剂、端粒酶蛋白抗体、PKC调节剂等； 寡核苷酸介导治疗 研究发现，针对人端粒酶RNA（human telomerase RNA，hTR）11个碱基区域的治疗可以直接抑制端粒酶的活性，因此是寡核苷酸治疗的理想靶点。 不论端粒酶全酶的结构如何，hTR的模板区域一定会连接到端粒的重复结构，因此就会出现靶寡核苷酸的暴露，这为寡核苷酸介导的治疗提供了理论基础。 实例 以hTR为靶点的反义寡核苷酸可降低胃癌细胞系SW480（人结肠癌细胞株）的活性，并同时诱导其凋亡。 反义hTERT抑制剂 抑制肿瘤的机制： 针对端粒酶RNA组分中含有与端粒DNA序列互补的碱基模板序列设计的反义核苷酸，具有阻断其模板的作用，从而抑制DNA端粒酶合成端粒DNA序列。因此，反义hTERT抑制剂可以抑制肿瘤细胞的端粒酶活性并导致细胞死亡。 实例 1989年美国加州大学的分子生物学教授Morin首次从人宫颈癌细胞株Hela细胞中发现并鉴定了端粒酶的存在。 应用反义hTERT转染人Hela细胞，发现端粒DNA逐渐丢失，经23～26个分裂周期后细胞就开始死亡。 总结 与传统放化疗对细胞毒性的比较，以端粒酶为靶向的治疗能减少对正常细胞的毒副作用。 同时肿瘤细胞的端粒酶活性要高于弱阳性正常细胞，因此，端粒酶抑制剂对端粒酶活性较高的、且端粒相对较短的肿瘤细胞可能发挥更大的作用。 谢谢！ Company Logo LOGO Company Logo Company Logo 马勒，他因发现X射线诱导突变而获得1946年诺贝尔生理学或医学奖。 麦考林托克，从事玉米遗传学的研究，19世纪下半叶到20世纪上半叶，遗传学界有三位伟大的科学家，他们的姓氏都以字母M开头。他们就是众所周知的孟德尔、摩尔根和麦克林托克。 在研究中，布莱克本与杰克·绍斯塔克发现，端粒中一段独特的DNA序列保护染色体免于退化；而布莱克本又与她指导的博士生卡罗尔·格雷德鉴别出了参与端粒DNA复制的一种逆转录酶——端粒酶。他们发现，端粒变短则细胞衰老，而端粒酶的活性能够维持端粒的长度。这些研究成果对癌症及其他疾病的研究具有重要影响。 ，从而维持端粒在复制分裂中保持一定长度，为细胞具有不断复制提供遗传基础。 癌细胞中端粒酶的激活及活性的维持可能是多种因素在多个水平对不同分子靶作用的结果。 首先利用端粒酶活性延伸前导链。依据不同来源端粒酶的作用特性来设计前导链引物碱基序列；其次用于端粒重复序列互补的反向引物通过PCR扩增端粒酶延伸产物。在此基础上，也衍生出很多更好的方法，像trap,trap-elisa等。 在通常情况下，正常细胞分裂伴随着稳定的端粒长度缩短，最终导致细胞老化和细胞分裂周期的停止。而端粒酶的上调可以维持端粒的长度，使肿瘤细胞能够突破正常的增殖限度，逃避细胞凋亡，从而导致肿瘤的发生。此外，抑制端粒酶的活性可导致肿瘤细胞的老化或凋亡，说明端粒酶活性是维持肿瘤细胞的长期生存所必需的。 其次，目前对于端粒酶催化亚基的抑制剂，国内外研究的比较深入的是反义hTERT抑制剂 端粒酶— —肿瘤治疗研究新方向 班级：医学生物技术专业2010级 学生：周冰峰 龙妮娅 学号：20100101001 20100101008 主要内容 背景 结构及作用机制 活性检测技术 肿瘤治疗方面的应用 前言 端粒是染色体末端的一段类似“帽子” 的特殊结构，由GC重复序列和蛋白质 组成； 端粒酶是一种核糖核蛋白体，能以自身RNA为模板合成端