非标记脱氧核酶构象改变荧光法检测铀酰离子.pdfVIP

第44卷第3期 应 用 化 工 V0I．44No．3 2015年3月 AppliedChemical Industry Mar．2015 碍 汐、 争 驴 驴 —驴 3分析测试3 争 、盘 、驴 、：g》 非标记脱氧核酶构象改变荧光法 检测铀酰离子 曹金秀，王永生 (南华大学公共卫生学院，湖南衡阳 421001) 摘 要：在 pH5．5MES缓冲溶液中，当体系中不存在铀酰离子时，SYBRGreenI(sG)能通过嵌入和小沟结合方式 与脱氧核酶作用，导致荧光增强 ；当铀酰离子存在时，脱氧核酶的rA碱基处断裂 ，游离出单链 ，此时SG与单链DNA 作用减弱，荧光信号降低，且体系的荧光强度变化值与铀酰离子浓度在 1．73×10一一4．40×10I暑mol／L范围内呈 良好线性关系，线性回归方程为△F=108．99C(×10 mol／L)+79．22，相关系数 r=0．990。根据空白管的标准偏 差Sb和标准曲线的斜率k算出LOD为5．2×10 。mol／L。该方法简便、选择性好、灵敏度高。 关键词：铀；脱氧核酶；SybrGreenI；荧光 中图分类号．TQ203．9；O657．32 文献标识码：A 文章编号：1671—3206(2015)03—0566—03 SpectrO|Ilu0rimetrydeterminationofUO22+ basedonanunlabelled deoxyribozymesconformationalswitching CAO n—xiu，WANG 一sheng (CollegeofPublicHealth，UniversityofSouthChina，Hengyang421001，China) Abstract：InMESbuffersolutionofpH5．5，SGcaninteractwithuranylspecificdeoxyribozymeshtrough boht intercalationandminorgroovebinding，resulting in fluorescenceenhancementin hteabsenceof UO2 ．ThepresenceofUO2 causescatalyticcleavageofhteDNA substratestrandattherAposition andreleaseofthessDNA．ThisleadstohtereductionofhteinteractionofssDNA wiht SG，causingade． creaseofhtefluorescenceintensityofhteassaysystem．Iedecreasedfluorescenceintensitywasproper- tionaltotheconcentrationofurnaylovertherangeof1．73×10一’一4．40×10一。mol／L．andhtelinear rergessionequadonwas△F=108．99C(×10 mol／L)+79．22withacorrelationcoefficientof0．990． Thelimitofdetection (LoD)was5．2×101。moL／L．Theproposedmethodwassimple，selectiveand sensitive． Keywords：uranyl；deoxyribozymes；SybrGreenI；fluorescence 铀是重要的国防和能源物质，它的日益增长的 点，但考虑到环境样品组分复杂、含量低以及昂贵仪 开发和利用给人类带来了福音；同时，也增加了人们