高通量超灵敏的声波膜微粒蛋白检测技术及其在肿瘤研究中的.PDFVIP

Gene Express 基因快讯2011年第2期 高通量超灵敏的声波膜微粒蛋白检测技术及其 在肿瘤研究中的应用 蛋白质定量检测技术被广泛的应用于生物标志物研 究，药代动力及药效研究，毒物代谢动力学，生物药物 Anti-Tag Ab Functionalized Sensor 质量监控以及产品纯度检测等领域。在药物研发方面， 检测样品中的某种蛋白质的存在能够揭示出药物是否与 Tagged Ab 靶分子结合；在药物生产方面，检测结果能够帮助确定 Target Protein 蛋白质样品的纯度和安全性；在诊断医学方面，该技术 Biotinylated Capture Ab 还能够用来检测病人体内是否含有某种疾病的分子指示 Strep-Coupled 物等。为了适应复杂生物样品中微量蛋白的检测需要， Magnetic Microparticles TM 美国BioScale公司最近推出了一种全新的蛋白检测技术， 图2 AMMP Assay 声波膜微粒技术 （Acou stic Membrane MicroParticle ， 2 ．混合物持续流过Anti-tag包被的传感器，此时声波 AMMP ）。 传感器表面膜以正常频率震动。然后在传感器下方施加一 BioScale公司的AMMP技术，是一种整合了磁珠、声 个磁场，将磁珠吸附到传感器表面。 波传感器以及生物捕获的蛋白检测方法 （图1）。AMMP 3 ．去除传感器表面的磁场，此时只有那些带有三明 技术采用包被有特定抗体的磁珠对生物样本中的目标蛋 治结构的微球仍然会结合在传感器上 （即结合了感兴趣的 白进行捕获，然后通过检测声波传感器结合磁珠前后， 分析物的微球），而空的微球由于不能和传感器上的anti- 其表面质量变化而造成的声波频率的变化，来对目标蛋 tag结合，所以被洗掉了。 白进行检测，从而实现了检测的微量化和高灵敏度。与 4 ．随着缓冲液洗脱能力的增加，结合在传感器上的 传统光学检测技术相比，AMMP技术具有更高的检测灵 微球被陆续洗脱下来。洗脱的顺序与微球上结合的待测物 敏度，更宽的检测范围和更快的检测速度：由于非光学 呈正相关，即微球表面结合的物质越多，就越难被洗脱。 的物理信号放大方式可以检测到那些被基线噪音覆盖而 由于微球结合到传感器后引起传感器表面质量的变化，进 无法被传统光学方法检测到的低丰度蛋白，检测下限可 而影响了传感器表面膜的振动频率。因此，当微球被洗脱 以达到0.1pg/ml ，因此AMMP技术特别适用于那些复杂样 后，系统会精确、定量的对振动频率的变化进行检测，并 本，如细胞裂解液或血清中蛋白检测。