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小鼠肝糖原的提取与鉴定实验报告(共8篇) 肝糖原提取、鉴定与定量实验流程 肝糖原提取、鉴定实验流程 吸取1ml量溶液时使用可调微量移液器，吸取1ml以上量溶液时使用刻度吸量管。 鸡肝约1.5 g，剪碎 ＋5%CCl3COOH 1 ml ＋5%CCl 3COOH 3 ml 3分钟（4000 r / min） 3 ml） ＋3ml 95%乙醇，混匀，静置10分钟 4000 r / min） ＋蒸镏水1 ml 沸水浴2分钟，溶解沉淀 糖原溶液1ml ＋浓HCl 5滴 2 2滴 滴 ＋班氏试剂4滴 2分钟，观察变化 肝糖原定量实验流程 鸡肝0.15 g ＋ 30%KOH 1.5ml （用吸量管） 沸水浴15分钟 取3支试管，按下表操作。 试剂（ml） 蒸馏水 标准葡萄糖溶液 糖原提取液 0.2%蒽酮溶液 （用吸量管） 空白管 1.0 — — 2.5 标准管 — 1.0 — 2.5 样品管 — — 1.0 2.5 混匀，沸水浴10分钟，冷却c。在分光光度计620 nm波长处，用空白管溶液调零，测定各管溶液的吸光度（A）。 饱食鸡肝的肝糖原含量为：2～3g/100g肝组织 篇二：肝糖原的提取、鉴定与定量 生物化学实验报告 姓 名： 学 号： 3130010071 专业年级：2013级临床医学 组 别： 第2实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 肝糖原的提取、鉴定、分离 实验日期 2014-12-25 合作者 评分 陈海玲 教师签名 实验地点 第2实验室 指导老师 朱利娜 批改日期 一、实验目的 1、掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3、正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。 4、熟练运用溶液混匀的各种方法。 5、正确掌握溶液转移的操作。 6、正确操作使用分光光度计。 二、实验原理 ? 肝糖原的提取 糖原储存于细胞内，采用淹没匀浆等方法可使细胞破碎，低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质，而糖原仍稳定地保存于上清液中，从而使糖原与蛋白质等其他成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水，故先用95%乙醇将绿叶中糖原沉淀，再溶于热水中。 ? 糖原的鉴定 糖原水溶液呈乳样光泽，遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中，依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。糖原还可被酸水解为葡萄糖，利用呈色反应和葡萄糖的还原性，可判定肝组织中糖原的的存在。 CuSO4 + 2NaOH = Na2SO4 + Cu(OH)2Cu(OH)2 + C6H12O6 = 2CuOH + 氧化型葡萄糖 + H2O 2CuOH = H20 + Cu2红色) Cu(OH)2 ==== H2黑色) ? 肝糖原的定量 糖原在浓酸中可水解为葡萄糖，浓硫酸能使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物——5-羟甲基呋喃甲醛，此化合物再与蒽酮脱水缩合生成蓝色的化合物。该物质在620nm处有最大吸收。糖含量在10—100mg范围内，溶液颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量的标准溶液比色，通过标准对照法即可计算出样品中糖原的含量。糖原在浓碱溶液中非常稳定，故在显色之前，肝组织先置于浓碱中加热，以破坏其他成分，而保留肝糖原。 三、实验材料 ? 仪器： 1、普通离心机，室温-100℃恒温水浴箱（x2），722型分光光度计，精度为 10mg级电子天平 2、剪刀、镊子、研钵 3、试管架，离心管，试管 4、刻度吸量管（2ml ,5ml），1000μl微量可调取液器 5、100ml容量瓶 6、白瓷反应板 ? 试剂： 鸡肝、95%乙醇、0.31mol/L(5%)三氯醋酸溶液、0.15mol/L NaCl溶液、浓HCl、 12.5mol/L(50%)NaOH、碘试剂、班氏试剂、30%KOH溶液、标准葡萄糖液（50mg/L） 蒽酮显色剂 四、实验步骤 ? 肝糖原的提取 鸡肝约1.5g，剪碎 +5%CClCOOH 1ml 3 研磨至乳状 +5%CCl3COOH 3ml 研磨成肝匀浆 全部转入离心管中，离心3min（4000r/min） 取上清液 +5ml 95%乙醇，混匀，静置10min 离心5min（ 4000r/min） 取沉淀 +蒸馏水2ml 沸水浴2min，溶解沉淀 +浓HCl 0.2ml 15min，冷却 糖原溶液0.1ml 呈色对比 +班氏试剂0.2ml(4d) 混匀 沸水浴，观察变化 ? 注意事项： 1、提取肝糖原时，向上清液中加入等量的95%乙醇后，必须混