支原体肺炎诊的断及病原学检测.ppt

支原体肺炎诊断及病原学检测;肺炎支原体肺炎的诊断;;;病原学诊断;血清学诊断标准;人类对Mp无先天免疫性，尚无可实际应用的有效疫苗，感染后也不能产生完全的保护性免疫 Mp特异性的IgM抗体在发病后不久即可出现升高，1~4周内达到峰值，然后在几个月内逐渐下降到没有临床意义的水平。急性感染后IgM的持续时间在不同个体中差异较大。儿童的IgM反应一般强于成人，约50%的成人患者无法在Mp感染后测到IgM的升高 IgG的出现时间晚于IgM，5周左右达到峰值，上升速度较慢且在体内的持续时间较长（4年左右），但在感染数月后就会下降到较低水平。有些儿童无法测得明显的IgG反应 特异性IgA的免疫反应与IgM类似，但其在成年人尤其是老年人中的反应水平更高;血清学检测原理;凝集试验与ELISA的原理比较;补体结合实验;冷凝集试验：冷凝集素是对Mp最早的体液反应，50%的病人在Mp感染第2周时的滴度可达到1:32以上，而6周内即降至感染前的水平。冷凝集试验虽然简便、快速，但它不是针对Mp的特异性试验，多种其他微生物感染（如EB病毒、巨细胞病毒、肺炎克雷伯菌）和自身免疫性疾病时冷凝集素滴度均可升高。同时，该试验的敏感性也只有50~60%，对于12岁以下的儿童其敏感性则更差 补体结合试验(CFT)：十几年前，CFT仍是Mp血清学试验的标准方法，但越来越多的研究表明该方法的敏感性和特异性都不够高。CFT所用的抗原为Mp的氯仿-甲醇糖脂抽提物，它可与人类、细菌及植物的某些抗原表位发生交叉反应（如脑膜炎时，CFT滴度可明显升高）。CFT测定的主要是IgM，对IgG不很敏感，导致其整体敏感性偏低。;间接血凝试验(PHA)：将提纯的Mp抗原连接到红细胞（禽类或羊）上，与血清中的抗Mp抗体可发生凝集反应。该试验的敏感性和特异性均明显优于CFT。PHA不能区分抗体的类型，因此单份测定出现低滴度的抗体阳性结果并不能确定是既往感染还是新近感染。 明胶颗粒凝集试验(PA)：其原理与间接血凝试验基本相同，只是用人工合成的明胶颗粒取代了红细胞作为凝集试验的载体，从而使结果判定更清晰，静置稳定性更好，非特异性反应大大减少，检测的敏感性也有了进一步提高（对IgM和IgA更敏感）;酶联免疫吸附试验（ELISA）：是目前Mp血清学试验中常用的方法，可分开检测IgM、IgG和IgA，敏感性和特异性均能达到较高的水平。虽然单次测定IgM （或IgA）阳性即可基本判定为Mp的新近感染，但阴性时却无法排除感染的可能性。IgG一般须进行间隔2周以上的双份血清测定，有4倍以上滴度上升时才能做出Mp新近感染的诊断。因此，在ELISA测定中应强调同时检测IgG和IgM （或IgA），且最好能对间隔2周以上的双份配对血清进行抗体转化情况的测定，从而做出明确的诊断 其它方法：间接免疫荧光试验（IFA）、乳胶凝集试验（LA）、免疫印迹测定（WB）、黏附抑制试验、放射免疫沉淀试验、补体介导的杀伤试验等; 其他病原学检测方法;