GC5_色谱条件选择_定性定量.ppt

现代仪器分析;第五节 色谱条件的选择;［例 ］在一根1m长的色谱柱上测得两组分的分离度为0.68,要使它们完全分离以(R=1.5),则柱长应为多少？解;二． 温度的选择 (柱温,气化室,检测器); ;。;不难看出，采用程序升温后不仅改善分离，而且可以缩短分析时间，得到的峰形也很理想。 ;（2）气化室温度 气化温度一般较高于样品沸点，但要防止气化温度太高造成试样分解。 ; ;三 .载气及其流速的选择 ; 当u较小时，分子扩散项B/u是影响板高的主要因素，选择相对分子质量较大的载气（N2，Ar），以使组分在载气中有较小的扩散系数。 当u较大时，传质阻力项Cu起主导作用，选择相对分子质量小的载气(H2,He)，使组分有较大的扩散系数，减小传质阻力，提高柱效。;载气应用最多是H2、N2和He气： H2 特点：分子量小，热导系数大，粘度小，在TCD上常用做载气；在FID上做燃气； N2特点：分子量大，扩散系数小，除了TCD外，其它检测器多用做载气. 氦气与H2性质类似，但安全，价贵 ; 最大允许进样量应控制在使半峰宽基本不变，而峰高与进样量成线性关系。如果超过最大允许进样量，线性关系遭破坏。 一般说来，色谱柱越粗、越长，固定液含量越高，容许进样量越大。 ; 第六节 定性分析方法 ; ;对照法;2．根据相对保留值定性 ;3．与其他方法结合 ; GC-MS; 第七节 定量分析 ;一.峰面积测量方法 ; （2）不对称峰面积的测量——峰高乘平均峰宽法 A=1/2h（W0.15＋W0.85） 式中W0.15和 W0.85分别为峰高0.15倍和0.85倍处的峰宽。 现代色谱仪器一般具有数据处理软件（工作站），可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。 ;二 .定量校正因子 ; fi′为换算系数，称为定量校正因子，式中mi为组分i的量，Ai为峰面积。 ; 1.重量校正因子定义为：样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。用下式表示 ; 相对校正因子 与试样、标准物质和检测器类型有关， 与操作条件、柱温、载气流速、固定液性质无关。;（3）相对校正因子的测量与计算 凡文献查得的校正因子都是指相对校正因子，可用fw,fm分别表示摩尔校正因子和质量校正因子（通常把相对二字略去）。 校正因子测定方法： 准确称量被测组分的对照品和标准物质，混合后，在实验条件下进样分析（注意进样量应在线性范围之内），分别测量相应的峰面积，然后通过公式计算校正因子，如果数次测量数值接近，可取其平均值。;校正因子 测量;三．常用的定量计算方法 ; 归一化的优点: 简便准确，当操作条件如进样量、载气流速等变化时对结果的影响较小。 适合于对多组分试样中各组分含量的分析。 归一化的缺点: 所有组分均要产生峰; 一般还要知道各组分的校正因子.;归一化; 某试样中含对、邻、间甲基苯甲酸及苯甲酸，并全部都在色谱图出峰，各组分相对重量和校正因子和色谱图中测得各峰面积列于下，用归一化法求出各组分的百分含量（P%）。 苯甲酸 对 邻 间 f 1.20 1.50 1.30 1.40 A 80 450 40 90 ;（二）内标法;对内标物的要求是： ㈠ 样品中不含有内标物质； ㈡ 峰的位置在各待测组分之间或与之相近； ㈢ 稳定、易得纯品； ㈣ 与样品能互溶但无化学反应； ㈤ 内标物浓度恰当，使其峰面积与待测组分相差不太大。; 选择一内标物质，以固定的浓度加入标准溶液和样品溶液中，以抵消实验条件和进样量变化带来的误差。内标法的校准曲线,是用Ai／As对Ci作图，其中As为内标物的峰面积。;在不知道校正因子时，内标法的应用。 方法是： 标准品溶义液：内标+标准品溶液； 样品溶液： 内标+样品溶液。;内标法优点： 减小仪器稳定性差，进样不准带来的误差。 配样品比较麻烦，内标物不容易找。; 以试样的标准品作对照物质，与对照物质对比求算试样含量的方法。 1．标准曲线法： （1）准确量取等体积一系列浓度不同的标准溶液分别进样，以峰面积A对C作标准曲线