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血片制作及染色
*;血片制作所需设备;*;*;*;涂制血膜规则;*;*;厚血膜 用推片的一角,从取血部位刮取约4 -5微升血量(相当于火柴头大小),使血滴与平置的载玻片接触,再由里向外一个方向旋转,转2~4圈,涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜
薄血膜再取一小滴血.将血置于离厚血膜适当的距离(0.5cm~0.7cm),将推片的边缘紧贴载玻片,轻轻上下移动,使血液沿边缘散开,然后匀速地向前推进,形成薄而平铺的薄血膜。;;*;标准的疟疾厚薄血膜片;*;*;*;*;血片的染色(一)染液的种类及染色原理;*;*;*;*;染色前薄血膜甲醇固定;厚血膜PBS或清水溶血;*;*;将已固定薄血膜的血片插入染色缸,倒入2%吉氏染
液(98毫升的缓冲液或净水中加入2毫升吉氏染液原液,混匀)浸没血片,染色30分钟。然后用清水轻轻将染液漂洗干净,将染色片插于晾片板上晾干,包装,待镜检(如果染色效果不理想时,得酌情增减染色时??和浓度)。 ; 单片染色在量筒内先加入1-2mlPBS缓冲液或净水,然后加入吉氏染液原液1-2滴(或按要求滴加),混匀后,均匀覆盖在已充分干躁的厚薄血膜上,染色20-30min。清水缓缓冲洗,晾干(血膜面朝内、厚血膜方向朝下),等待镜检。
要点:
量筒内先加入PBS,再加入吉氏染液原液
稀释好的染色液必须在60分钟内用完,超时重新配制;染色质量标准
显微镜下:疟原虫核呈红色, 胞浆呈蓝色,薄血膜的红细
胞单层排列,视野干净。
外观:标准颜色应为:血膜蓝中带紫色。如果血膜颜色偏红色,
说明染色偏酸性;血膜偏蓝色, 则为偏碱性。;*;*;*;*;*;*;*;*
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