Hcy測定試剂盒设计方案.docVIP

PAGE  山东威高药业有限公司GMP文件 WGP 北京 有限公司文件编号：CHS/SJ/D/SOP016-60版本/修改状态：B/00文件名称：同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法） 设计方案 受控状态： 受 控编制人： 日期：审核人： 日期：批准人： 日期：生效日期：分发部门：生产研发部、质量管理部 1 产品概述、处方及规格 1.1产品概述 本试剂通过测定人体液中同型半胱氨酸（Hcy）的浓度，主要是用于诊断心肌功能疾病。 产品测定原理： 同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。 产品处方 1.2.1 试剂为液体双试剂。校准品可使用朗道、罗氏等复合定标液。 1.2.2 产品所用主要原材料为S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）、 三（2羧乙基）磷氯化氢（TCEP）、α- 酮戊二酸、 Hcy甲基转移酶（HMTase）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶及腺苷脱氨酶（ADA）等。根据文献资料选用适当的缓冲液和稳定剂。 1.3 产品规格 产品包装规格制定要考虑不同适用机型和不同客户需求，根据以往经验，拟制定规格： R1-8 ml、R2-2 ml；R1-16 ml、R2-4ml；R1-20 ml、R2-5ml；R1-32 ml、R2-8ml；R1-40 ml、R2-10 ml；R1-2×40 ml、R2-2×10 ml；R1-4×40 ml、R2-4×10 ml；R1-2×40 ml、R2-20 ml；R1-4×40 ml、 R2-2×20 ml；R1-8×40 ml、R2-8×10 ml；R1-80 ml、R2-20 ml；R1-2×80 ml、R2-2×20 ml； R1-4×80 ml、R2-4×20 ml；R1-8×80 ml、R2-8×20 ml ；R1-60 ml、R2-15 ml；R1-2×60 ml、 R2-2×15 ml；R1-3×60 ml、R2-3×15ml；R1-8×50 ml、R2-2×50ml；R1-6×70 ml、R2-3×35ml； R1-5×40 ml、R2-50ml；R1-4×50 ml、R2-50ml； R1-3×60 ml、R2-45ml；R1-8×20 ml、R2-8×5 ml。 2 产品质量标准 根据《临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求》，应对试剂外观、净含量、试剂空白、灵敏度、准确度、批内精密性、批间精密性、线性范围和稳定性等做出要求和规定。 应参考已上市产品并满足临床使用要求。 2.1外观 R1、R2均为无色至浅黄色透明液体。 2.2净含量 不少于标示值。 2.3试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度变化率 以蒸馏水为检测样本时，每分钟吸光度变化值(△A/min)的绝对值应不大于0.100A。 2.3.2试剂空白吸光度 以蒸馏水为检测样本时，吸光度应不小于0.800A。 2.4准确度 以质控血清（如Roche公司生产的质控血清）为检测样本时，测定值在质控血清规定的可接受范围内。或用比对试验，相关系数r≥0.975,每个浓度点的相对偏差R≤20%。 2.5线性范围 Hcy试剂在线性范围0-50umol/L内， a)回归系数r应不小于0.990; b)线性偏差应不大于15%。 2.6 分析灵敏度 Hcy含量为10umol/L时，测定吸光度变化率(减掉试剂空白吸光度变化率) △A ≥0.002Abs/min。 2.7 重复性 2.7.1测量精密度 同一个试剂盒分别测定高低两个样本值所得的结果，变异系数CV≤8.0%。 2.7.2批间差 连续三批生产的不同批号的试剂测定同一样本，相对偏差R≤20%。 2.8 稳定性 Hcy试剂贮存于2℃－8℃、避光环境中，有效期为12个月。 3研制要求 3.1对试剂所用原料进行选择，试剂配方进行优化，确定所用原料的浓度，在保证产品质量的前提下尽量降低成本。 3.2 对反应体系进行研究，选择最佳加样方案，兼顾反应的灵敏度和线性范围，并适合在全自动生化分析仪上应用。 3.3 对生产工艺进行研究，以使研制的产品能够顺利进入生产程序。 3.4 对试剂的分析性能进行评估，对产品质量标准中的各项进行实验评价并确定最终要求，据此拟定注册产品标准。 3.5 实验确定该项目的正常参考值。 3.6 稳定性研究：试制至少三批样品，在实际储存条件下保存至成品有效期后，检测各项性能指标是否仍能达到