皱纹盘鲍SRAP反应体系的正交优化.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 大 连 海 洋 大 学 学 报? ???．?????．?? ???????年 ?月? ??????????????????????????????????? ??? ．?? ???? 文章编号 ：????— ????????????—????— ??? 皱 纹 盘鲍 ????反应 体 系的正 交优 化? 刘明泰?，李杨?，刘小林?，许淑芬?，常亚青。? ??．大连海宝渔业有 限公司 ，辽宁 大连 ??????；?．西北农林科技大学 动物科技学院，陕西 杨凌 ??????；?．大连海洋大学? 农业部北方海水增养殖重点实验室 ，辽宁 大连 ???????? 摘要 ：采用??????正交试验设计方法，对影响皱纹盘鲍 ???????????????????????????反应体系的 ????浓? 度 、?????浓度 、引物浓度 、模板 ???以及 ???酶活性进行 了优化 ，建立 了适用于皱纹盘鲍 的 ????反应? 体系。优化后 的反应体系 ???? ?包括 ??? ?．??????／?，???????．???????／?，引物 ?．???????／?，???酶? 活性 ?．????，模板 ?????????。采用不 同模板和引物对体 系进行验证 ，表明优化后 的反应体 系能够高效地? 扩增出可识别条带 ，为进一 步应用 ????标记对皱纹盘鲍进行遗传分析奠定了基础 。? 关键 词 ：皱纹盘鲍；????；正交试验设计；分子标记；反应体系? 中图分类 号 ：????．?? 文献标 志码 ：?? 皱 纹 盘鲍 ??????????????????????是 中国北 方 地? 中 ，在 贝类 中 目前 尚未见 相 关报 道 。有研 究 认 为 ，? 区重 要 的 经 济 贝类??，随 着 工 厂 化 养 殖 的 发 展 ，? ???反应条件是影响 ????标记扩增效率的重要因? 迫切需 要对其 开展分 子育种 的相关研 究工作 。 目前? 素? 。本研究 中 ，作 者 利 用 正 交 试 验设 计 方 法 探? 常 用 的分 子 标 记 主要 有 随机 扩 增 片段 多 态 性? 讨 了 ????标记在皱纹盘鲍群体 中的最佳反应条? ??????、微 卫星 、单核 苷 酸 多态 性 ?????、扩 增? 件 ，以期 为 ????标 记应用 于皱 纹盘鲍 的种质 资源? 性片段 多态 性 ??????等 。其 中微卫 星 标记 应 用 最? 评估和遗 传育种 奠定基础 。? 为广泛 ，但其 特异性 引物开发 成本较 高 ，???分 析? ? 材 料 与方 法? 需要 进 行 大 量 测 序 ，???? 技 术 重 复 性 较 差 ，而? ????技术则操 作繁琐??。上述各 种标记 各有 优? ?．? 材料? 劣 ，而一种理想的标记要求不仅成本低廉