育麟方加减改善卵巢储备功能的临床及作用机制研究-浙江中医药网.doc

项目名称：育麟方加减改善卵巢储备功能的临床及作用机制研究 推荐单位：浙江省中医药管理局 项目简介： 育麟方是何氏女科四代名中医的临床经验的结晶，目前已成为我们治疗肾虚型不孕症、复发流产、月经失调等疾病的有效方剂。前期《育麟颗粒对排卵障碍大鼠下丘脑神经元超微结构和ERmRNA表达的影响》课题通过动物实验研究揭示了育麟方改善生殖功能的部分作用机制。本课题在此基础上，通过建立卵巢储备降低大鼠模型，观察育麟方对其血清抑制素B(INHB)，抗苗勒管激素（AMH）以及卵巢颗粒细胞超微结构形态学方面的影响。结果显示：与模型组比较，中药治疗组大鼠血清FSH 、LH水平及 FSH/LH有显著差异；中药低、中、高剂量组血清抑制素B水平均显著增高；中剂量组血清AMH水平显著增高；低剂量组透射电镜下可见细胞胞体较大，糖原颗粒较多，胞浆内有大量成簇分布的脂滴，线粒体形态正常，数量较多，细胞间隙较小。同时还观察了育麟方对50例卵巢储备功能降低患者中医临床症状及性激素水平的影响。研究表明育麟方能够降低环磷酰胺导致的卵巢储备功能下降模型大鼠血清FSH 、LH水平及FSH/LH比值，提高AMH、INHB水平，修复模型鼠卵巢颗粒细胞超微结构，降低卵巢储备功能降低患者的血清FSH水平，有效改善其临床症状，促进生殖机能的恢复。 本课题研究过程中培养博士研究生1名，硕士研究生2名，发表相关论文10篇。参加学术交流5次。本研究成果为临床治疗卵巢储备功能下降提供了具有重要理论与实践价值的资料，进而为制定相应的中医或中西医结合治疗方案提供依据。育麟方目前作为院内协定方在杭州市中医院临床应用近10年，取得很好的疗效。在温州、东阳、余杭等地区，育麟方被广泛应用于促排卵、改善卵巢储备下降等方面多年，临床疗效满意。当地多家医院表示，与以往的辨证治疗相比，应用育麟方能够缩短疗程，提高临床愈显率，在调周治本的前提下，能够起到改善内分泌紊乱的内环境，达到阴阳平衡，脏腑气血协调等效果，充分体现了流派经验方的临床有效性及实用性。如果进一步进行推广，将会产生很可观的经济和社会效益。 主要科技创新： （1）本项目??创中药育麟方，全方由菟丝子，仙灵脾，枸杞子，当归，熟地，覆盆子，炙甘草等中药组成，既温养先天肾气以生精，又培补后天脾胃以生血，并佐以调和血脉之品，共奏补肾益精、养血调冲之功效。观察该方对卵巢储备下降患者血清雌二醇（E2），促卵泡素（FSH）、黄体生成素水平（LH）及二者比值变化进行研究。表明育麟方可明显改善不同年龄阶段卵巢储备降低患者基础激素水平；育麟方可明显改善不同年龄阶段卵巢储备降低患者的卵泡质量。 （2）首次观察了育麟方对环磷酰胺腹腔注射致卵巢储备下降大鼠血清抑制素B(INHB)，抗苗勒管激素（AMH）等细胞因子以及透射电镜下卵巢颗粒细胞的超微结构的形态学方面的影响。表明育麟方可有效改善环磷酰胺损伤致卵巢储备降低大鼠模型血清抑制素B(INHB)，抗苗勒管激素（AMH）等细胞因子水平；能够有效改善不同年龄阶段卵巢储备降低患者B超下窦卵泡计数、卵巢体积以及透射电镜下模型鼠卵巢颗粒细胞的超微结构。 （3）通过育麟颗粒对下丘脑神经元ERα mRNA及ERα表达的影响研究，从基因、分子水平阐释中药促排卵作用机制；试验证明育麟颗粒能纠正模型组大鼠下丘脑神经元ERmRNA表达水平及分布，能提高模型大鼠下丘脑弓状核神经元ER的表达水平；在一个试验中联合检测大鼠下丘脑神经元ERα mRNA及ERα表达和下丘脑神经元的超微结构；在一个试验中联合检测下丘脑、垂体、卵巢、子宫的ERα表达；将上述诸多形态学指标和血清激素E2、P共同监测；提出中药育麟颗粒对于排卵障碍的治疗，是通过多途径和多靶点，在下丘脑、垂体、卵巢、子宫等各水平共同起作用的，育麟颗粒对机体的整体调节上育麟颗粒明显优于克罗米芬。 主要完成人及技术贡献： 何嘉琳：课题负责、设计，病例搜集。作为何氏妇科第四代嫡系传人，她继承并发展育麟方在临床的应用，该课题针对育麟方通过调控卵巢颗粒细胞的分泌功能途径改善卵巢储备功能这样一个问题，初步阐发育麟方作用机制。该项目的实施对充分发挥中医妇科治未病优势，促进女性生殖健康和优生优育，延缓女性生殖衰老将产生积极意义。对实验结果的分析，资料和文献收集，文章撰写都起主要作用。 王素霞：主要负责临床病例的搜集工作，指导动物实验，并对研究结果进行分析探讨。对病例及实验数据统计分析、文章撰写及课题结题都起到重要的指导作用。 章勤：主要负责临床病例的搜集工作，并对研究结果进行分析探讨。 赵宏利：主要负责临床病例的搜集工作，并在文章撰写及统计分析中给予指导。 陈舒：主要负责动物实验的实施及相关论文的撰写。 蔡彬彬：主要负责动物实验的实施及相关论文的撰写。 方晓红：主要负责动物实验的指导。 高涛：主要负责临床病例的搜集工