第6章节蛋白质结构和功能.pptVIP

第六章 蛋白质的结构和功能;主要内容;6.1、肌红蛋白和血红蛋白;肌红蛋白的结构;肌红蛋白与氧的结合;血红素分子结构;肌红蛋白与氧的结合;肌红蛋白与氧的结合;Mb和Hb多肽微环境的作用;氧的结合改变了肌红蛋白的构型;血红蛋白的结构;;血红蛋白是一个高对称性蛋白。Hb分子近似球形，4个亚基占据相当于四面体的4个顶角。4个血红素基分别位于每个多肽链的E和F螺旋之间的裂隙处，并暴露在分子的表面。;氧结合引起的血红蛋白构象变化;血红素铁0.039nm的微小位移导致血红蛋白构象的改变。;氧合血红蛋白和去氧血红蛋白代表不同的构象态。（T态和R态） 氧合导致稳定T态的离子键和盐桥的断裂，血红蛋白的氧结合过程是一协同过程。;血红蛋白结合氧的协同作用示意图;Mb和Hb的氧结合曲线;H+、CO2和BPG对血红蛋白结合氧的影响;H+和CO2促进O2的释放（Bohr效应）;BPG降低Hb对O2的亲和力;Hb和两个β亚基之间的离子键结合;BPG和二氧化碳对Hb氧合曲线的影响;BPG对Hb氧合曲线的影响;胎儿和成人的血红蛋白氧合曲线;镰刀状细胞贫血是分子病;镰刀状细胞血红蛋白可形成纤维状沉淀;6.2、免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）;6.2.1、抗体的产生：;6.2.2、免疫球蛋白的类别;IgG是血清中最丰富的免疫球蛋白。;6.2.3、IgG的结构;轻链和重链 —轻链：25KD，214个氨基酸 —重链：50KD，450-570个氨基酸;Gerald M. Edelman;;可变区又可进一步分为超变区（或称互补决定区）和骨架区。;由于富含Pro，所以铰链区具有很强的柔性。;6.2.4、免疫球蛋白的功能;免疫球蛋白对抗原的识别;;;激活补体：激活补体功能是抗体对微生物或靶细胞杀伤的主要机制之一。只有免疫球蛋白与抗原结合后，才有激活补体的功能。;结合细胞：免疫球蛋白的C3区存在可以和多种细胞（巨噬细胞、肥大细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞）的表面Fc受体结合的位点，从而发挥调理作用、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用、介导I型超敏反应等。;;;介导I型超敏反应;6.2.5、多克隆抗体与单克隆抗体;单克隆抗体是由生长在细胞培养物中的同一B细胞的群体（一个克隆）合成并分泌的、均一的、识别同一抗原表位的抗体。;6.2.6、基于免疫反应的生化分析方法;酶标仪???酶标板;基本原理;ELISA的基本类型;ELISA的基本类型;ELISA的基本类型;免疫印迹测定（Western blotting）是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法。将含有目标蛋白(抗原)的样品首先用电泳分离后，通过转移电泳转印至硝酸纤维素膜或其它膜的表面，然后将膜表面的蛋白质再用抗原抗体反应进行特异性检测。;Western blotting;免疫亲和层析（Immunoaffinity chromatography）是利用抗原和抗体所具有的专一亲和力而设计的层析技术。抗原和抗体在一定条件下能紧密结合成复合物，而这种结合又是可逆的，改变条件可将抗原抗体解离。当把抗原和抗体的一方(称配体)结合在惰性载体上使其固相化，另一方随流动相流经该载体，双方即结合为一整体。然后设法将它们解离，从而得到与配体有特异结合能力的某一特定的物质。;