多糖研究方法和其进展1.pptVIP

多糖的研究方法及其现状;生命的四大物质： ; 六十年代以后, 随着现代仪器分析方法的飞速发展,使人们能成功的分离纯化和鉴定生物体内微量活性物质, 从而对糖特别是多糖的认识产生了飞跃。 ; 愈来愈多的研究发现, 人的生命过程几乎都与糖链有关: 如 细胞间通讯, 识别和相互作用 细胞的运动和粘附 病原与宿主细胞的作用 等等. 这是因为糖链携带着生物信息. 它在细胞表面的分子识别过程中起着决定性作用. ;血型 ----红血球表面糖链末端糖基的不同 ;多糖的研究己愈来愈受到人们的关注. ——国内外正在形成热点 生物细胞 特征: 繁殖(复制)?凋亡 ----平衡 平衡破坏: 细胞过度增生---组织表 面大体积堆积(肿瘤)---增生 细胞基因突变(癌) 癌细胞源于正常细胞 找既抑制癌细胞又不 伤正常细胞----困难 ;多糖是一种免疫调节剂 (激活机体免疫反应) 但也有少数多糖具直接杀死癌细胞作用 或两者俱存 ---- 治疗机体免疫功能受到严重损伤的癌症和爱滋病 ;但是 多糖的研究必竟起步较晚; 多糖的构效关系的研究是寻找高活性多糖及深入研究多糖作用机制的基础;最近 作用机理研究 -------进展快; 多糖在机体免疫反应中相当于抗原 ----免疫细胞可识别多糖 ---迅速被多糖诱导激活产生免疫反应 多糖作用机理研究集中于: 1.多糖与免疫细胞是否有分子水平接触? 2.怎样接触? 免疫细胞表面是否存在识别 多糖的受体? 3.免疫细胞激活后如何协同作用杀死癌细胞? ;;正在深入研究中: ?-D-(1→3)-Glucan ----抗肿瘤 水溶 水不溶 不同立体结构(单螺旋 三螺旋 无规线团 半柔顺链 聚集体) 不同构象-----不同活性 ----由于细胞表面受体蛋白具特定构象---只识别特殊构象多糖 杂多糖 糖蛋白 α-D-(1→3)-Glucan -------显著抗肿瘤; 阐明 多糖---靶细胞上受体 -------分子水平药物设计 -------重要指导意义 多糖 分子内及分子间 较强氢键作用 -------不溶于水 ---影响活性 大量实验表明 衍生化 ----水溶???提高----活性提高 ——近代研究另一热点 ;; 2. 半合成方法 衍生化基团取代 ---多糖中羟基中H 原 子---改变氢键作用---成盐—改善溶解性 羧甲基化 硫酸化 磷酸化 羧甲基化 (1) 多糖(0.15M NaOH, 95oC, 2h)—残渣水洗至中性---悬浮于0.06%NaCl---醋酸调pH至4.5(50oC 6h)---悬浮液pH调至碱性---氯乙酸反应---羧甲基化多糖钠盐. ; (2)多糖均匀分散异丙醇中---加粉状NaOH--- 搅拌---氯乙酸进行非均相反应----产物 硫酸化 在质子惰性溶液(DMSO, DMF)中进行---加入一定比例氯磺酸吡啶盐---控制温度及时间---获得不同取代度的硫酸酯化多糖;可以上述两种方法结合 如: 分枝的 α-(1→3)-Glucan 先去侧链, 再羧甲基化---获得线状羧甲基葡聚糖 (显著免疫及抗肿瘤活性) ----美国专利报导 ---己应用于灵芝 灰树花 巨大口蘑 水溶性好 抗癌活性高的衍生物;目前研究得较为深入：;影响构效关系研究:;2) 多糖的体内药物代谢动力学研究困难; 己有的实验证明影响多糖生物活性的主要因素： 分子量,分枝度,高级结构,溶解度,粘度等 ;蘑菇类产生具抗肿瘤作用的多糖:;香菇多糖,云芝糖肽,裂褶菌多糖 -------正式在临床上应用 ; 特别是具有抗炎作用,抗病毒作用,降血糖作用,刺激神经细胞作用的多糖问世;实验证明: 许多属去邪扶正的中药 ----发挥主要作用的大多是多糖成份;必威体育精装版报道 藻类中主要存在的硫酸酯多糖 ——可以抑制HIV-I表面糖蛋白gp120与免疫细胞表面CD4＋受体的结合 ——抑制合胞体的形成 特别适合制成一种外用型杀菌剂