基因工程基本操作过程选编.ppt

1.2基因工程的基本操作程序;复习提问： 1、基因工程需要的三种工具是什么？ 2、限制酶的作用是什么？ 产生的DNA片段末端通常有哪两种形式？ 3、DNA连接酶有哪两种？ 它们的作用是什么？ 4、能“缝合”平末端的是哪种酶？ 5、基因工程中最常用的运载体是什么？;补:基因结构相关知识点;原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;; 基因工程的基本操作程序; 目的基因主要是指______________________;获得目的基因的方法;;基因表达载体的构建——核心; 科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。 然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。 ;基因表达载体的组成：;;;;;PCR技术—聚合酶链式反应;;5/;利用PCR技术扩增目的基因;PCR技术扩增过程;目的基因的mRNA;1.微生物作受体细胞原因：; 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌 导入植物细胞 整合到受体细胞的染色体上 目的基因的遗传特性得以维持稳定和表达;如果显示出杂交带，就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。;1.下表关于基因工程中有关基因操作 的名词及对应的内容，正确的组合是 ;3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是 A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B．有利于对目的基因是否导入进行检测 C．增加质粒分子的分子量 D．便于与外源基因连接 4. 有关基因工程的叙述正确的是 A．限制酶只在获得目的基因时才用 B．重组质粒的形成是在细胞内完成的 C．质粒都可作为运载体 D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5.哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因 6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( ) A．基因枪法 B．显微注射法 C.农杆菌转化法 D．花粉管通道法; 胰岛素是治疗糖尿病的特效药，长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 假如让你用基因工程的方法使大肠杆菌生产出人的胰岛素，想一想，如何设计？ ;一、目的基因的获取;2.基因文库的构建方法;逆转录法;①基因组文库的构建;② cDNA文库的构建-----反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;