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基于重组工程法高转化效率的大肠杆菌BL21_DE3_表达菌株构建_张飞飞
? ? ? ， 安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2015，43 20 29 － 31 72 责任编辑 李占东 责任校对 李岩 基于重组工程法高转化效率的大肠杆菌 BL21? DE3? 表达菌株构建 张飞飞1 ，石牡丹2 ，尚广东2* ? ， ? ， 1． 徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室 江苏徐州 221004 2． 江苏省微生物工程技术研究中心 江苏 ， ， ? 省微生物与功能基因组学重点实验室 南京师范大学生命科学学院 江苏南京 210023 摘要 ［目的］提高最常用的异源蛋白表达宿主菌 E． coli BL21? DE3? 的转化效率。［方法］利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修 复功能。［结果］敲除了编码降解外源 DNA 的 I 型限制性内切酶的 hsdＲ 基因，获得了高转化效率以及其他功能与 BL21? DE3? 仍保持一致 的 LS1928 菌株。［结论］获得的 LS1928 菌株可能会作为获得催化用酶的关键材料，进而在蛋白质工程等研究领域有着重要的作用。 关键词 重组工程? 基因敲除? 双链断裂修复? 大肠杆菌 BL21? DE3? 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517 － 6611? 2015? 20 － 029 － 03 DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.20.011 Construction of Higher Conversion Efficiency Escherichia coli BL21? DE3? via Ｒecombineering ZHANG Fei-fei1 ，SHI Mu-dan2 ，SHANG Guang-dong2* ? 1． Jiangsu Province Key Laboratory of Anesthesiology，Xuzhou Medical Col- lege，Xuzhou，Jiangsu 221004? 2． Jiangsu Engineering and Technology Ｒesearch Center for Microbiology，Jiangsu Key Laboratory for Microbes and Functional Genomics，College of Life Sciences，Nanjing Normal University，Nanjing，Jiangsu 210023? Abstract ［Objective］ The aim was to improve the conversion efficiency of the most commonly used heterologous protein expression host strain． ［Method］Type I restriction endonuclease capable of degrading exogenous DNA coding gene hsdＲ was knocked out via plasmid-based recombineering system as well as its inherent doub
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