ELISA实验技术题稿.pptxVIP

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2017-04-24 发布于湖北
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ELISA实验技术题稿.pptx

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广州医科大学梁雪;;;;将抗体吸附到固相载体上;生物素-亲和素生物反应放大系统生物素易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了生物素分子的特异性抗体，与结合了酶（如：HRP）的亲和素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物（如：TMB）时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原（或抗体）分子的目的。;;固相抗体 eg. Capture antibody -- Mouse CXCL1/KC MAb (RD system) 标准品 eg. Standard--Recombinant Mouse CXCL1/KC Protein 结合物抗体 eg. Detection antibody -- Mouse CXCL1/GRO alpha /KC/CINC-1 Biotinylated Antibody 酶 eg. Streptavidin-HRP;固相载体 ;;加样 1 加样要加到孔底，但移液枪头不能接触孔底 2 不可溅出或产生气泡 3 标准品等比稀释的操作规范洗涤 1 洗涤次数适当 2 移液枪头悬空于孔上方 3 洗涤后孔内洗液尽量弃净比色 1 双波长法样本OD= OD450nm-OD630nm;空白对照例如：用PBS代替样品阴性对照检验试剂有效性的控制品，同时也作为判断结果的对照。例如：用标本/抗体稀释液代替样品阳性对照检验试剂有效性的控制品，同时也作为判断结果的对照。加入量应与试剂敏感度相称在测定中得到的吸光值与受检标本吸光值比较，定量标本待检抗原。;5.实例分析;结果分析;结果分析;7.ELISA的应用;