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分子生物学检测技术核酸分子杂交;核酸分子杂交技术一、 核酸分子;核酸分子杂交的基本原理DNA链;变性复性 DNA-DNA杂;二、核酸分子杂交的 探针（一）;2、标记物3、标记的方式放射性;DNA探针 DNA探针是最常;DNA探针最常用的核酸探针长度;DNA探针的主要优点①这类探针;cDNA探针cDNA（comp;无标题;无标题;RNA探针1、RNA探针是单链;寡核苷酸探针 利;（二）探针的标记 1、理想标;2、标记物（ 1） 理想标记物;（3）标记物种类 核素标;（3）标记方法 体;体外标记法： 化;酶促标记法切口平移法（nick;无标题;无标题;无标题;无标题;无标题;随机引物法 其原理是;随机引物法所具有的优点：1、能;PCR标记法：将标记的核苷酸作;无标题;（三）探针的纯化1、乙醇沉淀法;二、影响杂交的因素 1、核;2、温度： （1）DNA/D;3、离子强度： （1）低盐浓;4、甲酰胺： （1）甲酰胺能;5、核酸分子的复杂性： （1;6、非特异性杂交反应： （1;三、 核酸分子杂交的方法按待;带有DNA片段的凝胶DNA分子;（一）Southern印迹杂交;2、待测DNA样品的电泳分离 ;3、凝胶中核酸的变性（碱变化）;4、Southern印迹 ;（1）固相支持物的选择理想的固;常用的固相支持物 ;Southern印迹的常用方法;。;（2）电转法利用电场的电泳作用;无标题;（3）真空转移法 此;无标题;5、Southern杂交 ;6、杂交结果检测 （;7、Southern杂交的应用;（二）Northern印迹杂交;Northern印迹与Sout;（三）斑点及狭缝印迹杂交 ;（四）原位杂交 1;保持组织细胞的形态 对核酸无;（2）组织细胞杂交前的预处理 ;（3）探针的选择与标记 以获;（4）杂交 杂交液体积小：1;（5）杂交结果检测 所用探针
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