精浆果糖定量检测试剂盒(酶法)PPT汇编.pptx

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精浆果糖定量检测试剂盒(酶法)PPT汇编

深圳市博锐德生物科技有限公司 产品介绍 精浆果糖定量检测(酶法) 检测原理 实验原理 (酶法): 果糖 ——————→果糖-6-磷酸盐 果糖-6-磷酸盐——————→葡萄糖-6-磷酸盐 葡萄糖-6-磷酸盐 葡萄糖-6-磷酸 + ——————→ + NAD+ NADH 临床意义 精浆果糖是精囊分泌功能评价指标 先天性精囊缺如果糖测定为阴性。 不完全射精或射精过频,果糖含量亦降低。 用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症(果糖含量正常)和输精管、精囊发育不良引起的无精症。 (正常参考值:≥13μmol/一次射精) 与传统方法对比 方法学 酶法 吲哚法 原理 已糖激酶分解果糖为果糖-6-磷酸,后者可变构为葡萄糖-6-磷酸,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化葡萄糖-6-磷酸和NAD+生成NADH,通过监测340nm波长处NADH的吸光度值,并消除标本中葡萄糖对结果的影响后,可检测出标本中果糖的浓度。 果糖与吲哚在强酸、加热环境中生成有色复合物,在470nm波长处有最大吸收峰,其吸光度大小与果糖含量成正比。 试剂 无强酸强碱。 需要浓盐酸。 标本准备 3000g离心10min。 去蛋白室温静置10min。 1000g离心10min。 去蛋白需放置15min,再离心20min。 操作步骤 37℃反应。 反应过程理论需时40min。 全自动、半自动生化分析仪或手工操作均可。 操作过程中需要50℃水浴和冰水冷却。 反应过程理论需时70min。 再分光度计比色,手工检测。 结果 酶法特异性高,只检测果糖。 吲哚法,易受其他糖类成分干扰 实验所需设备及要求 酶标仪波长340nm,(或博锐德公司的生殖医学全自动、半自动生化免疫分析仪) 高速离心机(有离心力显示) 病例分析 某男,33岁,多次检测无精子,低精液量。体检:第二性征正常,双侧睾丸、阴茎、附睾、输精管均无明显异常。染色体核型分析未发现异常, 血激素检测正常, 精液检测结果如下: 精液量: 1.2ml, 不凝固, pH6.8, (离心后) 未发现精子。 问题:进一步分析需选择何种精液检测项目? 分析 可选择的检测项目: 1.精浆果糖 2.精浆中性α-葡糖苷酶 3.精浆弹性蛋白酶(感染性检测) 检测结果 精液量: 1.2ml, 不凝固, pH6.8, (离心后)未发现精子。 精浆果糖: 0(≥13μmol/1次); 精浆中性α-葡糖苷酶: 53.2mU/1次射精(≥20mU/1次); 精浆弹性蛋白酶:130ng/ml(600ng/ml). 问题: 如何确定该病人无精子症病因? 分析 进一步分析 假设检测结果如下: 精液量: 1.2ml, 不凝固, pH6.8, (离心后)未发现精子。 精浆果糖: 0 (≥13μmol/1次); 精浆中性α-葡糖苷酶: 3.2mU/1次射精(≥20mU/1次); 精浆弹性蛋白酶:130ng/ml(600ng/ml). 直肠B超检查 进一步分析 直肠B超显示:未见精囊输精管 精囊输精管缺如或发育不良 谢谢

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