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色谱法概述 产生及原理 发展史 分类 现代色谱技术 一、产生及原理 1906年俄国植物学家茨维特(M.S. Tswett)较完整地提出了色谱法。他把碳酸钙装在一根玻璃管中，将植物叶子的石油醚提取液例人管内，然后加入石油醚自上而下淋洗。随着淋洗进行，样品中各种色素向下移动的速度不同，逐惭形成一圈圈的连续色带，它们分别是胡萝卜素、叶黄素和叶绿素A、B。这种连续色带称为色层或色谱，由chroma (色彩) 和Graphos(图谱)构成“色谱”一词，色谱法由此而得名。 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置 色谱法是一种分离技术，当它被用作分析目的时，就是色谱分析。 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 原理： 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础 二、发展史 有关色谱法的研究工作，1834年业已开始，在前人工作的基础上茨维特于1906年提出了色谱法。这对科学事业是一项重要的贡献，但当时并没有引起重视，竟然事隔25年后，到了1931年库哈才重复了茨维持的工作。 在1952年马丁和捷姆斯一起进行了马丁在194I年发表论文中所预言的工作，提出了气液色谱法，用于分离、分析脂肪酸和脂肪胺等混合物取得成功，并对该法的理论和实验方法作出了精辟的论述。此后几年，气液色谱法得到飞速发展。 三、分 类 流动相 固定相 名称 气体 气体 液体 液体 固体 液体 固体 液体 1．按两相物理状态分类 2．按固定相所处的“形态”分类 1）柱色谱法 ； 2）纸色谱法； 3）薄层色谱法 3．按分离原理分类 1）吸附色谱法； 2）分配色谱法； 3）离子交换色谱法； 4）凝胶色谱法 a. 气相色谱 气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同分为：气固色谱和气液色谱 b. 液相色谱 液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。 c. 其他色谱方法 薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法 凝胶色谱法: 超临界色谱: 高效毛细管电泳: 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。 四、现代色谱技术 有关色谱理论和技术上的创新，在色谱发展过程中形成了几次重大的飞跃。其中最重要的贡献是Martin和Synge 1941年的实验和理论上的成就。他们首先提出了色谱塔板理论。 Martin预见了气相色谱的产生，1952年Martin和James首次用气体作流动相，以微量酸碱滴度作为检测手段，发明了气相色谱，它给挥发性化合物的分离测定带来了划时代的变革。 Synge预见了高压液相色谱的产生，在60年代末期为人们所实现。由于对现代色谱法的形成和发展所作的重大贡献，martin和Synge被授予1952年诺贝尔化学奖。 50一60年代是以气相色谱为代表的大发展时期。 70年代进入以高效液相色谱为代表的现代色谱时期。 80年代以来，HPLC的应用范围、文献数量已超过GC。 1975年，离子色谱的出现和各种金属螯合物色谱的迅速发 展，正在改变着现代色谱学的面貌。近几年，离子色谱成为发展最快的一个色谱分枝。 70年代，计算机技术进入色谱领域，以现了计算机控制的全自动色谱仪，导致现代色谱技术的又一重要发展——智能色谱。 1981年，Dupont公司生产的能自动选择最佳方法的液相色谱仪“探索者”(Sentinel)问世，并相继出现了各种智能色谱研究报告