小体鲟AR基因克隆_序列及其组织mRNA表达详解.pdf

中国水产科学 2014 年 11 月, 21(6): 1146?1153 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.01146 小体鲟 AR 基因克隆、序列分析及其组织 mRNA 表达 余晶1, 2, 董晓丽1, 张颖1, 刘晓勇3, 潘鹏3, 买丽坎3, 孙大江1 1. 中国水产科学研究院 黑龙江水产研究所, 黑龙江 哈尔滨 150070; 2. 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306; 3. 中国水产研究院 鲟鱼繁育工程中心, 北京 100039 摘要: 采用 RT-PCR 和 RACE 技术, 克隆了小体鲟(Acipenser ruthenus)雄激素受体(AR)基因 cDNA 全长序列, 应用 real-time qPCR 法对雌、雄个体不同组织中 AR mRNA 的表达进行检测。序列分析表明, AR 基因 cDNA 全长为 2 953 bp, 包括 5′端 68 bp 的非编码区(untranslation region, UTR), 2 528 bp 的开放阅读框 ORF(open reading frame)和 3′端 327 bp 的非编码区(不包括 ploy A 的尾巴)。AR 前体蛋白由 843 个氨基酸组成, 理论分子质量为 94.24 kD。同源比较结果 表明, 小体鲟 AR 氨基酸序列与其他鱼类的 AR 氨基酸序列同源性较高, 与杂交鲟(A. ruthenus × Huso huso)、西伯 利亚鲟(A. baerii)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)和日本鳗鲡(Anguilla japonica)的雄激素受体同源性分别为 99%、98%、 83%和 83%。real-time qPCR 分析小体鲟雌雄个体不同组织中的表达结果显示, AR 基因在雌雄个体中相对表达基本 相同, 都是在性腺、肌肉和肾中高量表达, 而在其他组织中少量表达。AR 基因在小体鲟体内广泛表达, 表明该基 因可能对其生长和繁殖有重要作用。 关键词: 小体鲟; 雄激素受体; 基因克隆; 序列分析; 组织表达 中图分类号: S917 文献标志码: A 文章编号: 1005?8737?(2014)06?1146?08 鲟(Acipenseriformes)是世界现有鱼类中体型 培育优质的雌性个体, 而鲟性成熟时间长, 成熟 大、寿命长的古老鱼类, 被称为“活化石”, 鲟类不 个体无副性征且卵巢发育易受环境影响。有关研 仅具有重要的食用、营养、滋补、保健、药用、 究发现,在鲟的养殖过程中其性腺出现分化异常 观赏等经济价值, 而且还具有重要的科学研究价 和发育停滞等现象, 并且这一现象在雌性中发生比 值 [1] 。小体鲟(Acipenser ruthenus) 隶属于鲟科 率更高[4]。因 此 , 掌握鲟类性腺发育规律及