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29-热休克_PolyI_C上调草鱼GRP78基因表达
应用与环境生物学报 2009,15 ( 6 ): 814~818 Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X 2009-12-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00814 热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)是一类存在于 机体内的热应激蛋白质,由一个庞大的蛋白家族组成,包括 HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和小分子量HSP等. 热休 克蛋白对维持细胞生存和内环境的稳定起着十分重要的作 用[1]. 葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein,GRP78), 又名免疫球蛋白重链结合蛋白(Immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是HSP70家族重要的一员,具有HSP70 家族典型的结构. 即N端(1~386位氨基酸)为ATPase结合结 构域,具 有结合和水解ATP的活性,其序列高度保守;C端 (542~646位氨基酸)是活性调节区域,同源性及功能在各家 族成员间差异较大;N、C端之间为相对保守的多肽结合部 位 [2]. 已有的研究表明,GRP78是一种非常典型的应急蛋白, 并可能具有较为广泛的生物学功能 [3]. Liu等(2006)发现, GRP78在低糖、低氧、低钙等应激状态下能够大量表达,起 到维持内质网的稳定,保护细胞内环境稳定的功能 [4]. 除了对 细胞内在因子的胁迫产生应答外,GRP78也能够对细胞外环 境因子,如温度、氧水平的变化和病害感染等的胁迫产生强 烈应答 [5~7]. 目 前 ,对 鱼 类 G R P 7 8 的 研 究 还 不 多 ,仅 在 虹 鳟 (Oncorhynchus mykiss)[8]、斑马鱼(Danio rerio,BC63946) 及牙鲆(Paralichthys olivaceus,DQ662232)中报道和鉴定 了GRP78. 鱼类 是 水生脊椎动物,对 水温 变化、病 害特 别 是 病 毒的 侵 袭 非常 敏 感 . 当受 到 上 述 环 境 胁 迫因子 胁 迫 时,GRP78有什么功能还不清楚 . 因此,本研究在克隆草鱼 (Ctenopharyngodon idellus)GRP78基因(FJ436356)全长序 热休克、Poly I: C上调草鱼GRP78基因表达* 吴初新1 刘 毅2 马梅生1 王丽坤1 胡成钰1** (1南昌大学生命科学与食品工程学院 南昌 330031) (2江西师范大学生命科学学院 南昌 330022) Up-regulation of Grass Carp GRP78 Gene Expression under Heat Shock and Poly I:C Stress* WU Chuxin1, LIU Yi2, MA Meisheng1, WANG Likun1 HU Chengyu1** (1College of Life Sciences and Food Engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China) (2College of Life Sciences, Jiangxi Normal University, Nanchang 330022, China) Abstract Glucose regulated protein 78 (GRP78), as a cellular stress-related protein, could regulate endoplasmic reticulum (ER) homeostasis by strongly responding to intracellular or extracellular stressors. The grass carp (Ctenopharyngodon idellus) GRP78 gene was cloned from mixed liver and kidney cDNA library. The full length sequence of 2 490 bp contained a 5’ untranslated region of 155 bp with seven heat shock elements and a 3’untranslated region of 373 bp. The open reading frame was 1 962 bp which could code a 653 amino acid peptide. The deduced a
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