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第5章节灭菌和无菌空气的制备
Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 发酵工程无菌技术: 纯培养发酵技术:发酵全过程只有生产菌,无杂菌 第五章 灭菌及无菌空气制备 在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的不良后果: 杂菌污染使基质或产物被杂菌消耗,造成生产能力下降; 杂菌产生的某些代谢产物,改变了培养液的理化性质,使提取精制发生困难; 杂菌可能会降解目的产物,使得生产过程失败; 杂菌会污染最终产品; 发酵时如污染噬菌体,可使生产菌发生溶菌现象,使生产失败 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 为了保证培养过程的正常进行,在接种要培养的微生物之前,需要进行灭菌与消毒。 灭菌对象:培养基;设备与管道;空气系统;流加料、消泡剂; 必要时还有对生产环境进行消毒,防止杂菌和噬菌体 工业上具体措施包括: 1)使用的培养基和设备须经灭菌; 2)好氧培养中使用的空气应经除菌处理 3)设备应严密,发酵罐维持正压环境; 4)培养过程中加入的物料应经过灭菌; 5)使用无污染的种子。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 消毒与灭菌在发酵工业中的应用 消毒(disinfection):用物理或化学方法杀死物料、容器器具内外病原微生物,而对被消毒的物体基本无害的措施。一般只能杀死营养细胞,例如巴氏消毒法(60℃,30min)。 灭菌(sterilization):用物理或化学方法杀死或除去物料、空气容器等环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。 关系:消毒不一定达到灭菌的要求,而灭菌可以达到消毒的目的。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 常用消毒、灭菌原理与方法 化学药剂消毒:甲醛或新洁尔灭、高锰酸钾等 使蛋白质凝固变性、酶失活;破坏细胞膜; 物理方法 辐射灭菌:紫外线、X射线,高能辐射与菌体核酸光化学反应 干热灭菌法:氧化作用、高温使蛋白质变性和电解质浓缩中毒 湿热灭菌法(最常用):蒸汽热使蛋白质变性,大分子氢键收到破坏; 过滤介质除菌√:微生物不能透过滤膜而除菌 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 湿热灭菌法 蒸汽具有强的热穿透力,灭菌易于彻底,效果最好,应用饱和蒸汽进行灭菌最为普遍。 适用范围:广泛应用于生产设备及培养基的灭菌 例如:实验室内的高压蒸汽灭菌、发酵车间采用的设备空消和培养基实消。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 过滤介质除菌法 过滤介质除菌 采用适当的过滤介质对热敏性的液体或气体进行过滤,去除微生物的方法。 液体:0.22μm或0.45μm滤膜 气体:纤维介质滤材捕捉极微小的悬浮微生物 适用范围:对压缩空气制备无菌空气;酶溶液、啤酒及其他不耐热化合物溶液除菌。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 高压蒸汽灭菌利用饱和蒸汽的高温杀死微生物的同时,高温还可能造成培养基成分的损失。 培养基灭菌的要求: 达到要求的无菌程度 尽量减少营养成分的破坏。在灭菌过程中,培养基组分的破坏,是由两个基本类型的反应引起的: 培养基中不同营养成分间的相互作用; 对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解 合理选择灭菌条件的关键:了解灭菌温度、时间对微生物死亡和培养基成分破坏的关系。 第
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