第2章节核酸的结构与功能.pptVIP

第二章 核酸的结构与功能 核酸研究史 1869年，年轻的瑞士医生Miescher从收集的绷带上脓细胞的细胞核中得到含有碳、氢、氧、氮和高浓度磷的白色沉淀，称其为“核素”,后来发现它有很强的酸性，又称为核酸。之后不久，Hoppe-Seyler从酵母细胞中分离出一种类似的物质—核糖核酸RNA。经过70多年后，人们对核酸及组分化学性质才逐步有所了解。1939年，Knapp等第一次用实验证实核酸是遗传物质基础。1944年，Avery等人通过肺炎双球菌转化实验直接证明DNA是携带遗传信息的分子，Hershy和Chase通过噬菌体的感染实验，也证实DNA是遗传物质。1953年Watson和Crick在总结前人工作的基础上提出了DNA双螺旋结构模型，为核酸的结构与功能研究奠定了基础，也大大推动了分子生物学特别是分子遗传学的发生和发展。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1956年A. Kornberg发现E. coli DNA聚合酶，1958年分离该酶并在体外环境下酶促合成有活性的DNA,1959年诺奖。 1958年Meselson用著名的“密度转移”试验证实DNA的“半保留复制”；建立密度梯度离心。1968年冈崎片段发现后提出DNA半保留不连续复制。 1959年S. Wess发现转录酶。 1960年Jacob Monod经10余年研究后提出乳糖操纵子模型，同时预言mRNA的存在。 1961年S. Spiegelman在T2感染的E. coli中发现mRNA，建立分子杂交技术。 1965年R. W. Holley测定酵母丙氨酸tRNA的一级结构，提出tRNA的“三叶草”结构模型。 1966年M. W. Nirenberg和H. G. Khorana完成全部遗传密码的破译。 1967年Kates和McAuslan发现真核转录酶，1970年发现真核mRNA 含有polyA尾巴(在天花病毒感染细胞中发现），用oligo(dT)柱分离纯化真核mRNA。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1968年M. Gellert等5个实验室发现DNA连接酶，为发展体外DNA重组技术鉴定了基础。 1970年H. M. Temin和D. Baltimore同时发现不同反转录病毒的逆转录酶，补充“中心法则”。 1970年H. O. Smith发现第一个II型DNA限制性内切核酸酶Hind II，导致一系列DNA限制性内切核酸酶发现及应用，和DNA连接酶一起促进了DNA体外重组的发展。 1972年P. Berg等三人建立DNA重组技术，建立了第一个体外DNA重组分子(? dvgal DNA片段克隆到SV40)。并建立了含有哺乳动物激素基因的工程菌株，促进了DNA克隆技术的发展和应用。 1975年Furuichit和Miura研究质型多角体病毒，发现真核mRNA中的m7Gppp帽子结构。 1977年P. Sharp 和P. Leder分别从腺病毒II型和鸡卵白蛋白基因中发现真核基因内部含有内含子。 1977年和分别发明了不同的测序技术，前者发明了化学断裂法，后者发明了加减法和聚合酶链式反应终止技术（即双脱氧终止技术），他因此第二次获诺贝尔奖。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 长期以来，人们一直相信所有的酶都是蛋白质，1981-1982年，Cech和Altman各自独立地发现RNA具有生物催化功能，取名为ribozyme（核酶）,这打破了蛋白质对生物催化剂的一统天下，极大促进了有关生命起源、生物进化等生物学中带根本性问题的进一步研究。 1985 Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应（Polymerade chain reaction,PCR）,这是一种体外扩增DNA的酶促反应技术，又称PCR扩增。 PCR技术的问世，极大地方便了DNA的克隆、鉴定及应用，因此在很短时间内迅速进入生命科学、医