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生物技术实践 一、考纲要求 1、DNA的粗提取与鉴定 2、微生物的利用 （1）微生物的分离和培养 （2）某种微生物数量的测定 （3）培养基对微生物的选择作用 （4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 3、酶的应用 （1）酶活力测定的一般原理和方法 （2）酶在食品制造和洗涤等方面的应用 4、生物技术在食品加工及其他方面的应用 （1）植物的组织培养 （2）蛋白质的提取和分离 （3）PCR技术的基本操作和应用 二、命题方向 选修一模块的意义不仅在于培养科学探究能力，还让学生了解生物技术在社会生活、生产、发展中的应用。结合《课标》和《考纲》来分析，考虑到选修一模块归到实验部分来考查，所以这一模块的备考重点应放在实验基本原理、实验主要流程、基本方法、规范操作、结果评价上，以及主要的概念、术语、生物技术的实际应用方面。备考过程还要注间兼顾本模块和其他模块相通的、联系比较密切的内容，如植物的组织培养、PCR技术、酶活性的测定与酶的实际应用、培养基、无菌操作等。在培养实际操作能力时注意操作的目的和原理、操作对象和工具的性质、操作的顺序和要领、观察与分析效果等方面去指导和规范操作。 专题一 微生物的利用 课题1 微生物的培养 一、培养基 1、概念：根据微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质 2、营养要求：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子（蛋白胨、牛肉膏分别主工为微生物提供什么） 3、种类：（1）按物理性质划分 种类 是否含琼脂 固体培养基 是 液体培养基 否 菌落是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。、、 说明：该方法既可杀死病菌又能保持物营养物质和风味不变，常用于食品消毒。 Ⅲ、、、 Ⅰ、 【巩固练习】 1、有关倒平板操作错误的是 　A、将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上　　B、使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 　C、将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上　　D、等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 2、有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 　A、首先将菌悬液进行一系列的梯度稀释 　B、然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 　C、适宜条件下培养　　　　D、结果都可在培养基表面形成单个菌落 3、关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是 　A、操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌　B、将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 　C、待培养基冷却至50oC左右进行倒平板D、待平板冷却凝固约5－10分钟后将平板倒过来放置 4、获得纯净培养物的关键是 　A、将用于微生物培养的器皿、接种工具、培养基等进行灭菌　　　B、接种纯种细菌 　C、适宜环境条件下培养　　　　　　　　　　　　　　　　　　　D、防止外来杂菌的入侵 5、下列关于灭菌的说法中，不正确的是 　A、灭菌是杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子 　B、对不同的生物材料，应采取不同的灭菌方法 　C、培养基一般采用高压蒸汽灭菌法　　　　D、高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性 　　　 课题2 微生物的分离和计数 一、微生物数量的测定 1、活菌计数法（稀释涂布平板法） （1）依据：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少个活菌。 （2）统计活菌的数目：挑选菌落数在30－300的平板进行计数。 注：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 2、显微镜直接计数法（抽样检测法） （1）原理：利用特定的血球计数板或血细胞计数板，在显微镜下计数一定容积样品中微生物数量。 （2）缺点：不能区分死菌和活菌 二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1、实验原理：（1）用以尿素作为唯一碳源的选择培养基筛选出能分解尿素的细菌 （2）细菌中的脲酶将尿素分解成氨，氨使培养基碱性增强，pH升高。加入酚红指示剂，则会变红 2、实验流程及分析 注意：1、样品稀释倍数依计数微生物种类的不同而有差异，一般细菌:104、105、106倍稀释；放线菌：103、104、105倍稀释；真菌：102、103、104倍稀释。 2、培养时间和温度依培养微生物种类的不同而有差异，一般细菌：30～37℃培养1～2d；放线菌：25～28℃培养5～7d；霉菌：25～28℃培养3～4d。 三、分解纤维素的微生物的分离 1、实验