电化学石英晶体阻抗和FTIRATR研究BSA在羟基磷灰石、TiO2表面的吸附.pdfVIP

i月 湖北·武汉 2006年i 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 电化学石英晶体阻抗和FTIR-ATR研究BSA 在羟基磷灰石、Ti02表面的吸附 杨琴，刘美玲，张友玉’，谢青季，姚守拙 (湖南师范大学化学化工学院，化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室，长沙410081) BSA吸附过程中电极表面的质量变化和电榭蛋白质界面双电层中电容变化以及BSA构象变化等 信息。 关键词：电化学石英晶体阻抗：衰减全反射红外光谱法；Ti02；羟基磷灰石；BSA 1引言 在材料表面吸附的蛋白质可以调节组织细胞对外来植入体的生理反应川。因此，研究蛋白质在生 附机理以及构象变化，以便于进一步研究组织细胞与材料的相互作用。 紫外光谱‘21、X射线光电子能谱‘31及高效液相色谱【41等都可应用于蛋白质的研究。以上方法在 研究蛋白质吸附方面各有特色，但都存在如灵敏度不很高或难以获得实时信息等不足。EQCI经 证实能实时、灵敏监测电极表面过程、提供电极表面质量变化和体系物理化学性质变化信息。 系统研究蛋白质在不同生物活性材料包括HAP和Ti02表面上的吸附过程。 附过程及吸附动力学和吸附机理，考察其吸附过程中的构象变化。 2仪器与试剂 采用HP4395A阻抗分析仪，CHl660A电化学工作站和Nexus670型傅立叶变换红外光谱 仪。除HAP自制外，所有试剂为分析纯或优级纯。所有溶液均用二次蒸馏水现配现用。 3结果与讨论 3．1BSA吸附动力学研究 为吸附和重排两个过程，BSA在啊02上吸附速度慢于在HAP上的吸附，且难达到稳态。 3．2BSA在Ti02和H^P电极上的吸附后二级结构的变化 由于酰胺I带对蛋白质二级结构变化较敏感?且目前谱峰归属较成熟，常被用来分析蛋白质 基金项目：国家自然科学基金(No ·通讯联系人 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 Leftandmiddle ofPQCI BSA onto Fig．1 plots：ResponsesparametersdunngadsorptionTi02(A)andHAP(B) modifiedelectrode 11absorbanceat1545em。1ⅧtimeforBSAadsorbedonto Rightplot：Amide Ti02 HAP surface(B)．Line：experimental；Circles：fitted． 的二级结构变化【61．拟合BSA吸附前后酰氨I带去卷积和谱峰拟合曲线的结果见图2和表1．可 见A在固体表匿吸附后，口．螺旋结构明显减少，口-折叠相应增加，口-转角变化不大，表明BSA由 口．螺旋结构向=．折叠转变． △△△ 仃z168嘣艘．，j卿h孵。160。竹oo 1％博黼绥∞抨o㈣17001懈v龋艘162016∞ IR decon、oiutioncalvesand curvesofamideI 700-1600 adsorbedon Fig．2 fitting region(1 cm‘1)．BulkBSA(A)，BSA the ZnSe blank WaS Ti02(B)and ofO．05mol／LPBSsolution． HAP(C)coatedsurface．cBSA：20g／L．The spectrum 堡垒坦!兰!!竺璺璺!业!堕堕堕里堇垒塑!壁垒塑壁翌尘!里Q2：旦塑!Q坠鲤!坚堂! BSA a-Helix／％ 13-rum