甜瓜组织培养过程中的染色体数目变异.pdfVIP

·48· 2005年全国学术年会农业分会场论文专集 甜瓜组织培养过程中的染色体数目变异 谢丽琼刘晓颖马相汝张洪涛李冠+ (新疆乌鲁木齐新疆大学生命科学与技术学院830046) 摘要：以甜瓜组织培养过程中产生的不定芽为材料，观察了不同阶段不定芽中染色体数目发生变异 的频率，同时比较了在无外加诱变剂的情况下，甜瓜根尖与组培不定芽之间最大分裂相时间的变化。 关键词：植物学甜瓜组织培养染色体变化 甜瓜(Cucumismelo L)俗称哈密瓜，属葫芦科黄 将甜瓜种子剥去种皮，在超净工作台上用70％的 瓜属。在新疆已经有两千多年的栽培历史，是我区特 酒精灭菌30s，再用O．1％的氯化汞灭菌8rain，无菌水 有的瓜果种类之一，具有很高的经济价值，但是在种 冲洗5—6次，在无菌滤纸上沥干水分，接种于无菌苗 植过程中种质退化现象严重。随着植物组织培养技 培养基中。 术的日益成熟，人们正通过组织培养的方法来改良 种子萌发3d后，在超净台中将种子切去胚，子 和保持优良甜瓜品种。 叶纵切为三段，取中间子叶切块作为外植体接种于 据报道，植物体细胞离体培养过程中会出现广泛 芽诱导培养基中。子叶表面贴培养基培养。每20天 的细胞遗传学上的变异，变异率的高低影响移栽后优 继代一次，接种于继代培养基上。以长大于lena的组 良品质的保持。因此，在大量扩繁前。对培养材料进行 培芽为材料。 细胞遗传学鉴定是非常必要的。现在大多采用再生植 2．4染色体的观察 株的根尖、幼叶和花蕾等为材料观察变异，但这些材料 2．4．1对照根尖的染色体观察 的获得耗时、费工，而且不能保证再生植株的种质【t】。 2．4．2染色体的观察 而在组织培养中，组培芽的材料丰富，取材方便。因此， 直接利用组培芽进行染色体数目鉴定是一种快捷、方 2rain取材，置于固定液(无水乙醇：冰乙酸=3：1)qa固 便和有效的方法。 定24h,60℃下，1NHel解离8rain，常规方法制片，100 本实验采用1-2era组培芽为材料，在培养早期进倍物镜观察、计数。 行鉴定，及时切除变异高的不定芽，避免人力、物力资 2．4．3组培芽染色体的观察 源的浪费，为优质甜瓜种质的快速繁殖提供保障。 在显微镜下观察。随机选取中期细胞进行计数。 1实验材料 甜瓜品种金皇后种子，购自新疆农业科学院 2rain取材，置于固定液(无水乙醇：冰乙酸书：1)中固 2实验方法 定2h，60℃下，INHel解离10min，常规方法制片。100 2．1无菌苗培养基 倍物镜观察、随机选取中期细胞进行计数。 1／2MS+B5有机元素，芽诱导培养基：MS+6。BA3实验结果 0．5mg门_一十IAA0．3．1取材时问的确定 1．Omg／L，继代培养基：MS+6-BA 鉴于秋水仙素、低温等预处理都会引起染色体 05mg／L。培养条件：培养温度(25±Eye，光照强度 1500LX，16h／d。 不同程度的变异∞，无法确定变异是来自材料本身 2．2对照根尖的获得 还是由预处理所引起，因此，本实验采用间隔时间取 甜瓜种子剥去种皮，以水培法发苗，3d左右后根 材来确定不同材料的分裂高峰期，并获得了数量较 尖长至l～2cm，切取根尖作为对照。 多中期细胞。结果表明：对照根尖在早晨10-08分取 2．3组培芽的获得 材效果最好，而组培芽在10：04分取材效果最好。 基金项目：新疆自