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十章蛋白质和氨基酸的测定
氨基酸的分析 什么是氨基酸? 氨基酸的分类 氨基酸的化学结构? 氨基酸的两性电解质的特性 2D TLC AAs assay by GC 1.原理 将本身没有挥发性的氨基酸转变为适合于气相色谱分析的衍生物——三氟乙酰基氨基酸正丁酯。它包括用正丁醇的酯化和用三氟乙酸酐(TFAA)的酰化两个步骤。将酰化好的氨基酸衍生物进行气相色谱分析。 AAs assay by HPLC 1.高效液相色谱法适于分析沸点高、分子量大、热稳定性差的物质和生物活性物质。 2. 由于大多数氨基酸无紫外吸收及荧光发射特性,而紫外吸收检测器和荧光检测器是HPLC仪的最常的检测器。故人们需将氨基酸进行衍生化,使其可以利用紫外吸收或荧光检测器进行测定。 3.氨基酸的衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。柱后衍生需额外的反应器和泵,常用于氨基酸自动分析仪,如前文所提的茚三酮反应。 4. 在氨基酸的HPLC测定中,更多的还是采用柱前衍生法,这是因为比起柱后衍生法它的优点有:(1)固定相采用C18(反相色谱),可分辨分子结构细小的差异;(2)流动相为极性溶剂,如甲醇、乙二腈等,避免对荧光检测的干扰,可提高灵敏度及速度;(3)一机多用。 * 第十章 蛋白质和氨基酸的测定 第一节 概述 1,蛋白质是生命的物质基础: 是构成细胞的组成成分:细胞膜中的蛋白质,线粒体、内质网等细胞器上的结构蛋白或酶,染色体中的核蛋白,血液中的血红蛋白,也是激素和抗体的基本成分。 2, 担当重要的生理功能: 是生物体发育及修补组织时所需氨基酸的来源, 物质代谢的生物催化剂, 营养物质及气体的运输 遗传信息的传递与表达 人体内的组质液pH(健康pH在7.3-7.5之间)及水分的平衡 为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体; 一般认为成人每人每天营养需要量为:75克蛋白质。 蛋白质的组成及特性 蛋白质的组成: 蛋白质由很多的AA单体以肽键结合而成的具有一定空间结构的含氮有机化合物,有的含有P、S、 Cu、Fe、I等元素,分子量高达数万~数百万。含氮是蛋白质区别于其它有机化合物的主要标志。 蛋白质系数:一般而言,蛋白质含氮量约为16%,即1份氮相当于6.25份蛋白质,此数值(6.25)称为蛋白质系数。 氨基酸的种类: 自然界中已经发现的氨基酸约有170多种,其中组成蛋白的氨基酸只有22种(都是?-AA),其中对人而言的必需氨基酸有8种(犬的必需氨基酸有9种)。 组成蛋白的氨基酸(?-AA)的通式及AA两性电解质特性:? 部分食品的蛋白质含量 谷类和面食: (%) 大米(糙米、长粒、生) 7.9 大米(白米、长粒、生) 7.1 小麦粉(整粒) 13.7 玉米粉(整粒、黄色) 6.9 玉米淀粉 0.3 豆类: 大豆(成熟的种子、生) 36.5 豆(腰子状、所有品种) 23.6 豆腐(生、普通) 8.1 水果和蔬菜: 苹果(生、带皮) 0.2 芦笋(生) 2.3 草莓(生) 0.6 莴苣(冰、生) 1.0 肉、家禽、鱼: 牛肉(颈肉、烤前腿) 18.5 牛肉(腌制、干牛肉) 29.1 鸡(可供煎炸的鸡胸肉、生) 23.1 火腿(切片、普通的) 17.6 鸡蛋(生、全蛋) 12.5 鱼(太平洋鳕鱼、生) 17.9 鱼(罐装金枪鱼滴干的固体) 26.5 乳制品: 牛乳(全脂、液体) 3.3 牛乳(脱脂、干) 36.2 干酪 24.9 酸奶(普通的、低脂) 5.3? 优质蛋白质(对人类而言) 必需氨基酸: 在组成蛋白的氨基酸中,在人体内不能合成或合成速度很慢的氨基酸。 人类而言,优质蛋白质的定义: l??蛋白质中必需氨基酸的含量高,且总体氨基酸的组成比例接近母乳蛋白氨基酸比例的蛋白质。动物来源和豆类食品是很好的优质蛋白质。??? 一般而言:动物性蛋白所含必需氨基酸的种类及数量较多,而植物性蛋白所含必需氨基酸的种类及数量较少。 若蛋白质或某些必需氨基酸供给不足: l??????? 会导生物体生长发育缓慢,体重减轻,抵抗力下降,容易患病; l??????? 男性精液品质下降,精子数量减少,性欲降低; l??????? 女性引起不孕,即使怀孕,胎儿也常发育不良而发生死胎或畸胎。 开发蛋白质的生理效价高的食品及合理配膳等 是食品科学从业者的一项重要任务! 常用
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