小麦蛋白Alcalase水解物免疫活性肽的研究.PDFVIP

第22卷第3期 00DMACH舳RY Vo1．22．No．3 2006年 5月 May ，2006 小麦蛋 白Alcalase水解物免疫活性肽 的研究 Thestudyon immunopeptidesofwheatthroughhydrolyzing wheatisolatedproteinsbyalcalase 张亚飞 乐国伟 施用晖 林海华 ZHANGYa-fei LEGuo—weiSHIYong—hui LlNHai—hua (江南大学教育部食品科学与安全重点实验室，江苏 无锡 214036) (KeyLaboratoryofFoodScienceSafiey，Min~tryofEducation，SouthernYangtzeUniversity，Wuxi，Jiangsu214036，China) 摘要 ：实验研究了以Alcalase碱性蛋 白酶水解小麦分离蛋 白 含量丰富，Leu和Tvr含量也较多，其中Gin是快速分裂增殖 制备小麦肽 的工艺，分析 了温度 、pH值、底物浓度 、酶添加量 细胞的主要能量来源，可促进淋巴细胞增殖 ，具有免疫调节 和时间对酶水解的影响。通过正交实验得到 了Alcalase水 作用。 解小麦蛋白的最佳工艺，工艺参数为酶用量22．5 L／g，pH 1996年 Adamson研究发现 ，Alcalase在碱性环境 中具有 值 9．5，温度 60℃，底物浓度 4％，反应时间 100min，水解度 较高活性，与胰蛋白酶释放的肽段相比其肽段更短而产率更 18．63％。所得小麦肽混合物用离子交换树脂依据 电荷进行 高，可以裂解 Glu、Met、Leu、Tyr、Lys和 Gln的羧端肽键’。 初步分离获得4个组分。经过小鼠体外脾淋 巴细胞增殖反 因此本实验选取 Alcalase对小麦蛋 白进行酶解。水解之后 应(M1Tr法)鉴定其免疫活性，结果表明pH8和pHlO洗脱得 到的组分对小鼠脾细胞增殖具有较强的刺激作用，组分 中可 根据本研究所 自建活性肽数据库分析 j，免疫活性与电荷性 能含有对小鼠体外淋巴细胞增殖具有刺激作用的活性肽。 质可能存在一定关联，因此所得水解产物用离子交换树脂依 关键词 ：小麦蛋 白；小麦肽 ；Alcalase碱性蛋白酶 ；免疫活性 据电荷性质进行初步分离，通过小鼠体外脾淋巴细胞增殖试 Abstract：Preparation techniquesofwheatpeptidesthrough hydrolyzing 验测定活性 ，以期筛选出具有免疫活性的组分。 wheatisolatedproteinsbyAlcalasewerestudied．Throughorthogonaltest， effectsoftemperature ，pHvalue，concentrationsofsubstratum ，dosagesof l 实验材料与仪器 enzymeandtimeon enzymichydrolysiswerestudied．Theoptimum hy— 小麦蛋白：实验室提供； drolysisconditionsweredetermined：dosagesofenyzme22．5 I／g，pH AlcalaseFG2．4L：Novo公司； 9．5，60 ℃ ，substratum concentration4％ ，hy