微生物学第03章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全合编.ppt

第五节 抑制或杀灭微生物的理化因素 消毒灭菌的常用术语 灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。包括细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。 消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物、并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。 无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。 消毒灭菌的方法 物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 一、物理消毒灭菌法 （一）热力灭菌法 1.干热灭菌法 杀菌机制：使菌体脱水干燥、大分子变性。 杀菌条件：80~100℃ 1h可杀死繁殖体，160~170 ℃ 2h 可杀死芽胞。 常用方法 焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160-170℃ 2h 2. 湿热灭菌法 杀菌机制：在水分子存在情况下更易于使菌体蛋白凝固，热力穿透性更强。 常用方法 巴氏消毒法 煮沸消毒法 流通蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌法 巴氏消毒法 概念 方法 用途 煮沸消毒法 原理 灭菌条件 应用范围 流通蒸汽消毒法 原理 消毒条件 常用的器具 间歇蒸汽灭菌法 原理 方法 用途 高压蒸汽灭菌法 原理 灭菌条件 应用范围 注意 高压蒸汽灭菌锅 （二）辐射杀菌法 1.紫外线 杀菌波长 ：波长240～300nm的紫外线具有杀菌作用265～266nm杀菌能力最强。 杀菌机制：使胸腺嘧啶形成二聚体，干扰DNA的复制与转录。 特点：穿透力弱。 用途：空气、物品表面消毒。 注意：紫外线对眼睛、皮肤有损伤作用 特点：穿透力强，不破坏营养。 适用：塑料、食品、药品和生物制品消毒灭菌。 3.微波 使物品发热。 2.电离辐射 杀菌机理： 产生游离基，破坏DNA （三）滤过除菌法 原理 用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌、真菌,以达到除菌目的。 滤菌器 含有微细小孔0.1～ 0.45微米,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 。 用途 血清、毒素、抗生素以及药液的除菌 注意：病毒、支原体、某些L型细菌可以通过滤菌器 滤器和层流室 （四）干燥与低温抑菌法 不耐干燥的微生物。 低温一般不能杀死细菌。 冷冻真空干燥法：在低温状态下真空抽去水分 化学消毒灭菌法 消毒剂的种类 消毒剂的应用 酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂 人体体表、医疗器械、 周围环境 （一）杀菌机制 1.促进菌体蛋白质变性或凝固 to denaturate and coagulate proteins of bacterial cell 酚类--石碳酸、来苏、洗必泰等。 醇类--70%～75%乙醇杀菌力最强。 重金属盐类--红汞等。 烷化剂--甲醛等，杀菌力强，但毒性大，有致癌性。 2.干扰细菌的酶系统和代谢to interfere enzymatic system and metabolism of bacterium 氧化剂---过氧化氢、高锰酸钾 等，与细菌的酶结合使之失去活 性。过氧乙酸 对细菌繁殖体和芽胞、真菌、病毒都有杀灭作用。 3.损伤菌细胞膜  to damage cell membrance of bacterium 表面活性剂、脂溶剂：增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂。 注意：大多对人体组织有害，只能外用或环境消毒。 种类 使用浓度 用途 石炭酸 3%-5% 地面、器具表面、皮肤消毒 乙醇 70%-75% 皮肤、体温计消毒 高锰酸甲 0.1% 皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒 红汞 2% 皮肤、粘膜、小创伤消毒 硫柳汞 0.1% 皮肤消毒、手术部位消毒 过氧乙酸 0.2%-0.3% 塑料、玻璃器材消毒 碘酒 2%-2.5% 皮肤消毒 新洁而灭 0.05%-1% 手术洗手、浸泡手术器械 龙胆紫 2%-4% 浅表创伤消毒 （二）消毒剂的应用 （三）化学消毒剂按其杀菌能力分三大类 1.高效消毒剂 （high-level disinfectants） ①含氯消毒剂（次氯酸钠、二氯异氰酸尿酸钠