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HPV相关研究进展综述 摘 要：人乳头瘤病毒与宫颈癌的发生密切相关,是引起宫颈癌的主要生物学因素。随着分子生物学理论和技术的发展与提高,对HPV导致宫颈癌发生的基因特征和致癌机制进行了大量研究。该文综述了近年来HPV致癌机制、检测方法以及宫颈癌疫苗方面的研究进展。 关键词：人乳头瘤病毒；子宫颈癌；检测方法；疫苗 1 引言 宫颈癌是发生于子宫颈鳞状上皮或腺上皮的一种癌肿,是仅次于乳腺癌的最常见的妇女恶性肿瘤，全世界每年大约有510000例的宫颈癌新发病例,占所有癌症新发病例的9.8%，我国每年新发病例约为10万，占世界宫颈癌新发病例的四分之一[1]。宫颈癌的发生发展是一个由渐变到突变的过程，从宫颈癌前病变发展到宫颈癌大约是10年的时间，由于宫颈癌有较长的癌前病变阶段,因此可以使宫颈癌得到早期诊断，从而对于降低宫颈癌的发生率具有重要价值。20世纪70年代末，Zur[2]首先提出人乳头瘤病毒(human papilloma virus)为宫颈癌的病因假说,在随后的20多年中,各国学者对HPV的结构、功能、生物学特性、致癌机理等进行了大量的研究，从分子和基因水平对HPV与宫颈癌之间的关系进行了深入的研究,大量的流行病学和分子生物学研究资料表明,HPV感染与宫颈癌及癌前病变关系密切，是宫颈癌的主要危险因素。本文对HPV感染与宫颈癌关系的研究进展做一综述。 2 致癌机理 1949年，sttauSS首先在电镜下于疵体浸出液中观察到HPV颗粒，它是一种部位特异的DNA病毒[3]。HPV是一个7200～8000bp左右的双链环状的DNA病毒，HPV基因组编码有8个参与病毒侵染、繁殖复制和包装的功能蛋白，有8个开放式阅读框,含ORF编码的DNA链，按功能有3个功能区，按功能可以分为3个结构域，早期蛋白编码区ER，晚期蛋白编码区LR和上游控制区URR。E区分为E1~E7开发阅读框，主要编码和病毒的复制、转录、调控和细胞转换有关的蛋白，E1涉及病毒DNA复制,在病毒开始复制中起关键作用；E2是一种反式激活蛋白，涉及病毒DNA转录的反式激活；E3功能尚不清楚；E4与病毒成熟胞浆蛋白有关；E5正好位于E2的下游，编码一种小蛋白，与细胞转化有关；E6称为多功能蛋白，E6蛋白能与细胞内E6相关蛋白(E6AP)形成复合物，特异性地结合抑癌基因P53的产物,使P53降解失活，导致细胞周期失控[3~6]；作为一种多功能蛋白,它还可通过激活端粒酶使正常细胞永生化[7]；E7能与成视网膜细胞瘤(Rb)抑制蛋白结合，与HPV致癌的关系极为密切。L区分L1和L2，分别编码主要的衣壳蛋白和次要衣壳蛋白，L1区编码主要衣壳蛋白,是主要的种特异性抗原，它在真核细胞内具有自身组装成病毒样颗粒的特性,大量实验证明它具有较强的免疫原性,能刺激机体产生中和抗体IgG、IgA,可使机体免受相应病毒的攻击[8]；另外，L1蛋白还具有增强机体细胞免疫应答的功能，因此可作为研制HPV预防及治疗疫苗的理想靶抗原；L2区编码次要衣壳蛋白,是型特异性抗原。URR位于E去与L区之间，长约1kb，含有病毒基因组DNA。 HPV在上皮及粘膜的表面复制繁殖，子宫颈的鳞状上皮细胞与柱状上皮细胞的连接处是HPV的易感部位。HPV感染宿主细胞后,可以游离状态存在于宿主细胞中,也可与细胞染色体整合以整合状态存在于宿主细胞中。HPV的的致癌作用与HPV DNA的整合有关[9]。目前认为，整合后的DNA发生致癌作用的主要基因为E6、E7和E2。E6、E7原癌蛋白分别与细胞内肿瘤抑制物p53和视网膜母细胞瘤蛋白pRb结合使其失活是高危型HPV致癌的重要机制。宫颈上皮内瘤变细胞中HVP16、HVP18的DNA绝大多数呈整合形式,在浸润型宫颈癌中则以游离和整合形式共存[10~13]。在高危型HPV中，E6、E7是主要的转化蛋白,它们可以通过和p53及视网膜母细胞瘤蛋白的相互作用使正常细胞发生恶性转化。HPV能和宿主基因组发生整合，使E2开放读码框失活并失去其阻遏E6、E7转录的功能，多种基因改变的积累作用导致了癌症的发生。大部分免疫系统正常的人感染HPV后可以自行清除病毒并且不会发病，但是病毒的持续感染却容易诱发宫颈疾病。 3 检测方法 HPV DNA的检测是宿主遭受HPV感染的主要和直接依据,也是发现宫颈癌高危人群和癌前病变的有效手段[14]。由于HPV在体外不能增殖,传统方法主要通过形态方法和免疫学方法对其检测，较常用的实验室检测方法有核酸杂交、聚合酶链式反应(PCR)、杂交捕获(HC)试验和基因芯片技术等[15,16]。 （1）核酸杂交。核酸杂交主要包括Southern杂交、斑点杂交、原位杂交。核酸杂交试验具有较高的灵敏度,并可通过修饰探针对组织感染的HPV型别做鉴定,对感染者或患者的预后有较好的预测指导意义,但存在