实验八染色体核仁组成区的银染色法.ppt.ppt

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实验八 染色体核仁组成区的银染色法 杭州师范大学 刘姬艳 一、实验目的 掌握核仁组成区 (nucleolar organizing regions, NORs)的银染色(silver staining)技术,了解其实验原理。 二、实验原理 NORs是核糖体RNA (rRNA including 18S rRNA 28S rRNA)基因(rDNA)的分布区, NORs处与基因rDNA转录有关的酸性蛋白可被硝酸银特异染色(黑色)。 三、实验用品 1. 材料:小鼠骨髓细胞染色体标本 2. 试剂: 50%硝酸银溶液;2%明胶显影液 (含1ml甲酸);0.067 mol/L磷酸缓冲液 (pH6.8);2% Giemsa磷酸缓冲液。 四、实验步骤 1. 染色体标本玻片置于湿盒中,60oC水浴 2. 硝酸银2滴,明胶显影液1滴,盖上盖玻片,反应至颜色变黑; 3. 流水冲洗; 4. Giemsa复染3min; 5. 流水冲洗; 6. 观察。 七、实验报告与思考题 实验报告 1.绘制小鼠骨髓细胞中期核型图,标出Ag-NORs 的位置。 思考题 1.核仁组成区(NORs)与核仁(nucleolus)形成,核 糖体(ribosome)产生的关系 NORs in Mus musculus. Dev VG等1977 功能:与细胞间期核仁形成有关 结构: 与酸性蛋白结合

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