苹果MdDRB1基因在番茄中异位表达与功能_赵先炎概述.pdf

果树学报 2015，32（2）:177－185 JournalofFruitScience DOI:10.13925/ki.gsxb 苹果MdDRB1基因在番茄中异位表达与功能研究 赵先炎，赵 强，刘 鑫，郝玉金，由春香* （作物生物学国家重点实验室·国家苹果工程技术研究中心·山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安 271018） ：【【 】】将苹果 基因转入番茄中，探究苹果 基因在番茄中的异位表达与功能。【【 】】采用农 摘 要 目的 MdDRB1 MdDRB1 方法 杆菌介导法，将苹果基因MdDRB1转入番茄植物体内，用PCR检测到该基因已整合到番茄总DNA中。对获得的5个转 基因番茄株系进行半定量RT-PCR分析，挑选MdDRB1基因表达水平由低到高的3个株系，用实时荧光定量PCR检测 -1 -1 与生长素有关的miRNAs及相应靶基因的相对表达量。并对非转基因和转基因番茄进行3μmol·L IAA和5μmol·L IAA处理，对植株进行向光性检测。【【 】】转基因株系中miR164、miR160、miR393表达量下调，miR167表达量上调，同 结果 时，它们分别对应的番茄中的靶基因SlNAC1、SlARF10和SlARF16、SlTIR1的相对表达量上调，SlARF8相对表达量下 调。IAA处理后，转基因株系幼苗的侧根数目比未转基因植株增多，同时，转基因株系幼苗的向光性也增强。【【 】】苹 结论 果MdDRB1基因在番茄中的异位表达，通过抑制生长素响应相关的miR164、miR160、miR393和增加miR167的积累水 、 的转录后基因沉默作用，进而提高 平，部分解除其对下游靶基因SlNAC1 SlARF10和SlARF16、SlTIR1以及增加SlARF8 了转基因番茄对生长素响应的敏感性。 关键词：苹果MdDRB1基因；番茄；生长素响应；miRNAs 中图分类号：S66 文献标志码：A 文章编号：1009-9980(2015)02-0177-09 EctopicexpressionandfunctionalresearchofAppleMdDRB1geneinto? mato ZHAOXianyan，ZHAOQiang，LIUXin，HAOYujin，YOUChunxiang* （StateKeyLaboratoryofCropBiology·NationalResearchCenterforAppleEngineeringandTechnology·CollegeofHorticultureScienceand Engineering，ShandongAgriculturalUniversity，Tai’an271018，Shandong，China） Abstract: 【【Objective】】ToexploreectopicexpressionandfunctionoftheMdDRB1geneintomato，Apple MdDRB1 wastransformedintotomatoplants. 【【Methods】】Apple MdDRB1 genewasgeneticallytrans? formedintotomatowithan Agrobacterium-mediatedmethod.PCRanalysisverifiedthat MdDRB1 gene wasintegratedintothegeno