微生物实验07.微生物的接种及培养特征观察.ppt

实验七 微生物的接种及培养特征观察 在斜面固体培养基上：呈丝绒状、刺毛 状、串珠状、舒展状、树枝状、假根状等 在液体培养基内：呈均匀混浊、絮状、粘 液状，液面形成菌膜，或上层清晰而底部呈 沉淀状等。 在半固体培养基内：可以沿接种线向四周 蔓延（有鞭毛）；仅沿线生长；或底部长的 好、上层不长；或上层生长而底部不生长等 利用微生物的培养特征，可以作为 种类鉴定和识别纯培养是否被污染 的参考。 三、实验材料 菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌 培养基：牛肉膏蛋白胨的液体培养基、半固 体培养基和固体斜面培养基 器材：接种环、接种针、酒精灯等 四、操作步骤 （一）接种技术 1.斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另 一斜面管的方法。此法用于好氧微生物的接种。 左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量 放平。用右手先将棉塞拧转松动，灼烧接种环， 用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧， 同时将管口在火焰上灼烧一圈，接种环灼烧灭菌 后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底 部，沿斜面划线 曲线：用于培养菌种 直线：用于观察培养特征 2.液体接种： 由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三 角瓶等）中的方法。 操作与上法基本一致，只是在将接种环送 入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的 地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉 塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。 如果菌种是在液体培养基培养时，一般用无 菌移液管、移液枪或滴管接种,也可用接种环。 （二）在培养箱中培养 细菌36℃培养 真菌和放线菌在28℃培养 （三) 结果观察（细菌2d后看结果，放线菌 和真菌下周上课时观察） 注意事项 1、接种时严格无菌操作。 2、每次接种完毕要灼烧接种环（针） 3、斜面接种时，不要划破培养基，菌种不要沾到管壁上。 4、液体培养基接种时培养基不要流出来或沾染管口 5、穿刺时，手要稳，使穿刺线整齐。 作业 详细描述所用微生物在： 固体斜面培养基、 液体培养基 半固体培养基上的生长特征，并分析原因。 * * 淀粉培养基(g/L) 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g 淀粉 2g 琼脂 18g 水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min 注：先用小烧杯称取 淀粉，加少量水调成 糊状，再加到沸水， 加热溶化，再加其它 成分。 明胶培养白基(g/L) 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 明胶 120-180g 水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min 注：先称取明胶，加适量水，加热溶 化后再加其它成分 乳糖蛋胨培养液 蛋白胨 10g 乳糖 5g NaCl 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4 注：最后加溴甲酚紫。 115℃灭菌20min 一、目的要求： 1、学习、掌握微生物的接种技术。 2、了解不同微生物在固体斜面、液体和半固体培养基中的生长特征 二、实验原理 微生物的培养特征是指微生物培养在培养 基中所表现的群体形态和生长情况。 不同微生物在相同培养基上培养，群体形态 和生长情况不同。 3.穿刺接种（半固体培养基）： 用接种针挑取菌种后，从中间插入深层培养基内，（不要刺到底部，3/4），再沿原路拔出，此法用于厌氧细菌接种、检查细菌的运动能力。 4.平板接斜面： 一般是将经平板分离培养得到的单菌落接种到斜面，以便作鉴定或扩大培养、保存之用。类似斜面接种。??