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生物工程工艺实习报告
工艺实习报告 学院: 专业: 姓名: 学号: 日期:2014年9月12日 淀粉质原料生产酒精工艺 基本原理 利用薯类、谷类及野生植物等含淀粉的原料,在微生物作用下将淀粉水解为葡萄糖,再进一步发酵成为酒精。 实习目的 掌握淀粉质原料发酵生产酒精的工艺原理及生产过程中存在的问题。 工艺流程 水 蒸汽 糖化醪 酒母 蒸汽 成品酒精 原料 预处理 蒸煮 糖化 发酵 蒸馏 杂醇油 醛酯等 酒糟 图1 淀粉质原料酒精发酵工艺流程 操作过程 第一部分 糖化醪制备 实习目的 掌握糖化醪的制备过程。 理解糖化醪的制备原理。 二、仪器材料糖化锅、商品淀粉、α-淀粉酶、糖化酶、分光光度计、分析天平、盐酸溶液(20%)、氢氧化钠溶液200g/L。 标准葡萄糖溶液2.5g/L:精确称取2.5000g(称准至0.0001g)在105~110烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的葡萄糖,用水溶解定容至1000ml。 次甲基蓝指示液10g/L:称取1.0g次甲基蓝,溶解于水中,稀释至100ml。 斐林氏A、B液 a. 配制:斐林氏液A:称取分析纯硫酸铜69.28g,溶于蒸馏水中,稀释至1000ml,放置1d,过滤,贮于棕色瓶中。斐林氏液B:称取分析纯氢氧化钠100g和分析纯酒石酸钾钠346g,溶于蒸馏水中,稀释至1000ml,放置2d,用石棉垫抽滤。 b. 标定预备实验:取菲林试剂A、B液各5.00ml于250ml三角瓶中,加50ml水摇匀,在电炉上加热至沸,在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定,当溶液的蓝色将消失呈红色时,加2滴次甲基蓝指示液,继续滴至蓝色消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。 正式试验:取斐林试剂A、B液各5.00ml于250ml三角瓶中,加50ml水和比预实验少1ml的葡萄糖标准溶液,加热至沸,并保持2min,加两滴次甲基蓝指示液,在沸腾状态下于1min内用葡萄糖标准溶液滴至终点,记录消耗的葡糖糖标准溶液的总体积。 三、操作步骤1.取淀粉400g加入1800ml 45温水的糖化锅中搅拌均匀。加入02%氯化钙(3.6g)并调节pH6.0-6.2之间。 2.取α-淀粉酶,5U/g淀粉(2g),于50ml温水中浸泡15min待用。 3.一边搅拌淀粉溶液,一边将温度升高到50-60,然后加入α-淀粉酶液,再取50ml温水将残余酶液冲干净,并倒入淀粉液中。继续升温到75,保持15min,观察现象。过程中要继续搅拌。 4.继续升温到85,恒温20-30min,以碘液反应不变色,表示液化结束。 5.将上述醪液迅速冷却至58-60,调pH4.4-4.6 6.称取糖化酶(200U/g淀粉 4g),加入醪液中,60恒温1.5小时。注意记录醪液形态变化情况。 7.糖化结束,糖化醪液应用温开水补足蒸发损失水分,使总醪液为2000ml,并取样检测。 四、糖化醪的测定及数据处理1. 糖化醪还原糖测定 取糖化醪10ml,用水洗入250ml容量瓶中,加蒸馏水定容后混合均匀,然后吸入5ml注入盛有斐林甲、乙液各5ml和水20ml的150ml三角瓶中,按滴定法定糖。空白用5ml水代替样品测定。 (g葡萄糖/100ml) V1 …….. 空白滴定消耗的葡萄糖标液毫升数 V2 …….. 试样滴定消耗的葡萄糖标液毫升数 2. 糖化醪总糖测定 取糖化醪10ml,用水洗入250ml容量瓶中,加蒸馏水70ml和20%盐酸20ml,塞上一米长玻璃管的橡皮塞,沸水水浴60min,取出激冷,用20%NaOH中和到微酸性(缓慢中和不要过量),倒入250ml容量瓶中,按滴定法定唐。空白用5ml水代替样品测定,计算方法同“还原糖滴定”。 3. 糖化率计算 五、糖化醪结果及数据处理 1. 淀粉液化和糖化现象 (1)淀粉溶液中加入α-淀粉酶后由刚开始的糊状慢慢变稀,变透明状,粘度降低。 (2)加入糖化酶以后,醪液的颜色逐渐变深,颜色由:乳白色 乳黄色 淡黄色 2. 糖化醪还原糖测定 (1)实验现象: ①斐林试剂甲乙液混合溶液由浅蓝色变成深蓝色。 ②在电炉上加热至沸腾后,溶液蓝色褪去,生成砖
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