化妆品中二苯酮及甲氧基肉桂酸乙基己酯.doc

附件2： 化妆品中11种二苯酮类紫外线吸收剂的检测方法 (征求意见稿) 1 适用范围 本方法了化妆品中11 种二苯酮类紫外线吸收剂测定的高效液相色谱法。 本方法适用膏霜类、乳液类、水剂类、唇膏等蜡基类、指甲油类、粉等化妆品。本方法对11 种二苯酮类紫外线吸收剂的检出限和定量限及取0.1 g样品时的检出浓度及最低定量浓度见表： 表1 11种二苯酮类紫外线吸收剂的检出限、检出浓度、定量下限、最低定量浓度 序号 化合物名称 检出限μg /mL) 检出浓度(μg/g) 定量下限μg /mL) 最低定量浓度(μg/g) 1 二苯酮-1 0.45 4.5 0.15 15 2 二苯酮-2 0.4.5 0.15 15 3 二苯酮-3 0.60 6.0 0.20 20 4 二苯酮-4/5 20 0.70 70 5 二苯酮-6 0.60 6.0 0.20 20 6 二苯酮-7 30 1.0 100 7 二苯酮-8 0.5 4.5 0.15 15 8 二苯酮-9 0.5 4.5 0.15 15 9 二苯酮-10 0.60 6.0 0.20 20 10 二苯酮-12 0. 8.0 0.27 27 2方法提要 采用四氢呋喃-甲醇-水体系，提取化妆品中二苯酮类紫外线吸收剂，用高效液相色谱法进行测定。以目标物的色谱保留时间和紫外光谱图与标准物质一致进行定性，以色谱峰的峰面积用标准曲线外标法进行定量计算。。3 试剂除另规定外，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。3.2　甲醇，色谱纯。 3.　甲酸，色谱纯。 3. 醋酸铵，色谱纯。 3.　标准储备溶液：分别准确称取各标准物质1 mg（以上质量均精确至0.1 mg）于棕色容量瓶中，用四氢呋喃溶解后定容至10 mL（二苯酮-9除外），配置成浓度为1 mg/mL的标准储备液于冷条件下保存。二苯酮-9用40%甲醇水定容至10 mL，配置成浓度为1mg/mL的标准储备液于条件下保存。4仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器。4.3 超声波清洗器 4.4 蜗旋混合器 4.5 离心机4.6 分析天平：感量0.1 mg和0.01 mg。5分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品约0.1 g（精确至）于25 mL中，对水化妆品，首先向管中加入mL水，涡旋或超声使其均匀分散后，再向管中加入mL二氯甲烷，涡旋1~2 min5000 转/分离心5 min取2 mL，微孔滤膜过滤，待测。对化妆品，首先向中加入mL二氯甲烷，涡旋或超声使其均匀分散后，再向中准确加入mL水，涡旋1~2 min，混匀提取5000 转/分离心5 min 5.1.2 除二苯酮-9外其他二苯酮类防晒剂测试的样品前处理 称取样品约0.1 g（精确至g）于25 mL具塞中，向中加入2 mL四氢呋喃甲醇，涡旋1~2 min5000 转/分离心5 min取2 mL，聚丙烯微孔滤膜过滤，待测。 对唇膏等化妆品，首先向中加入2 mL四氢呋喃，涡旋或超声使样品完全分散。若不能分散适当超声可解决问题，对超声15 min仍无法分散的样品，需用60 水浴，振荡加热约1~2 分钟即可溶解分散。继续向试管中甲醇水，涡旋混合5000 转/分离心5 min5.2 分析步骤 5.2.1 色谱参考条件 色谱柱： C18柱（4.6 mm×150 mm ，5 μm）； 流动相：A： (含0.1% 甲酸及10 mM乙酸铵), B：(含0.1%甲酸)； 流量：1.0 mL/min；检测波长：311 nm；柱温：25℃；进样量：10 μL。 梯度洗脱条件：表2二苯酮类紫外线吸收剂的液相色谱分离条件 时间，min A，% B，% 0 94 6 3 60 40 4 40 60 11 0 100 1 0 100 19 94 6 20 94 6 5.2.2 校准曲线的制备准确移取标准储备液（二苯酮-9除外）μL于10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配置成200 μg/mL的混合标准溶液，取适量混合标准溶液，再用甲醇逐级稀释成100 μg/mL，50 μg/mL，10 μg/mL，5 μg/mL μg/mL的系列，构成个浓度的混合标准系列，标准系列应于使用前配制。二苯酮-9采用上述方法以水为溶剂进行系列浓度配制。10 μL系列标准进行数据采集，以系列标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，建立曲线。在设定色谱条件下，10 μL待测溶液进行高效液相色谱分析若待测溶液中的质量浓度超过校准曲线线性范围的上限，须对待测液进行适当稀释后测定。样品中的含量按计算公式计算。 按以上步骤，完成两份样品的平行测定。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10%。 式中：——从标准曲线中计算出的样品溶液中目标物的质量浓度，μg/mL；