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RP-HPLC 法检查丁酸氯维地平原料药中的有关物质 　　丁酸氯维地平(Clevidipine butyrate)系第3代新型短效二氢吡啶类注射用钙通道拮抗剂，治疗不宜口服或口服无效的高血压患者，尤其是对手术期间血压急性升高的降压效果明显。地平类降压药是降压药中市场占有量最大、应用最广泛的药物，由于丁酸氯维地平受到专利限制(商品名 Clev-iprex，注射乳剂，上市时间为 2008 年 8 月，临床用于降血压，尤其适用心脏手术期间的血压急性升高)，国内外相关文献资料极少，国内外药典也均未收载丁酸氯维地平原料药有关物质分析方法。随着其专利期临近，国内外会有更多关于丁酸氯维地平的研究陆续开展。为规范丁酸氯维地平原料药的合成与使用，提高其相关制剂的安全性和有效性，笔者采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法检查丁酸氯维地平原料药中的有关物质，对丁酸氯维地平工艺中可能产生的工艺杂质和降解杂质等进行研究，并计算已知杂质相对于主成分的校正因子，最后以不加校正因子的主成分自身对照法来计算单个杂质和总杂质的量，从而为丁酸氯维地平原料药的质量控制提供依据。 　　1 材料 　　1.1 仪器 　　1200型HPLC仪，包括G1314可变波长检测器(VWD)、Chemstation 色谱工作站等(美国 Agilent 公司);BP-211D 电子天平(德国赛多利斯公司)。 　　1.2 药品与试剂 　　丁酸氯维地平对照品[简称对照品 A，4-(2，3-二氯苯基)-1-4-二氢-2-6-二甲基-3，5-吡啶二甲酸甲基(1-丁酰氧基)甲酯，批号：120929，纯度：99.6%]、样品丁酸氯维地平原料药(批号20130802纯度：99.90%、99.85%、99.90%)、杂质B对照品[4(-2，3-二氯苯基)- 2-6-二甲基-1-4-二氢吡啶-3，5-二羧酸单甲酯，批号：130311，纯度：98.7%]、杂质C 对照品[4-(2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基-烟酸甲酯，批号：130112，纯度：99.1%]、杂质D 对照品[4-(2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基-1，4-二氢吡啶-3，5-二羧酸二甲酯，批号：130429，纯度：98.4%]、杂质E对照品[4(-2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基吡啶-3，5-二羧酸-3-丁酰氧甲基酯-5-甲酯，批号：130506，纯度：98.6%]、杂质F对照品[4-(2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基-1，4-二氢吡啶-3-羧酸甲酯，批号：130303，纯度：99.0%]、杂质G对照品[4-(2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基-1，4-二氢吡啶-3，5-二羧酸-3-丁酰氧甲基酯-5-乙酯，批号：130321，纯度：99.2%]、杂质H 对照品[4(-2，3-二氯苯基)-2，6-二甲基-1，4-二氢吡啶-3，5-二羧酸二丁酰氧甲基酯，批号：130402，纯度：99.3%]，均来源于上海信谊药厂有限公司;甲醇、乙腈均为色谱纯，磷酸为分析纯，水为去离子水。 　　2 方法与结果 　　2.1 溶液制备 　　2.1.1 系统适用性溶液。精密称取对照品A 20 mg，置于10ml 量瓶中，定量加入杂质 B～H 的对照品溶液(“2.1.4”项下溶液)1 ml，用乙腈溶解并稀释制成含丁酸氯维地平质量浓度约为2.0 mg/ml、各杂质质量浓度约为2 mu;g/ml的溶液，即得。 　　2.1.2 供试品溶液。精密称取样品丁酸氯维地平原料药约20mg，置于 10 ml 量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，即得(2.0mg/ml)。 　　2.1.3 对照溶液。精密量取“2.1.2”项下供试品溶液1.0 ml，置于100 ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得1%对照溶液。 　　2.1.4 杂质对照品溶液。分别取杂质B～H对照品约10 mg，置于50 ml量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度;精密量取该溶液1.0 ml，置于10 ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，制成各杂质质量浓度为20.0 mu;g/ml的溶液。 　　2.2 色谱条件与系统适用性试验 　　色谱柱：Waters Symmetry ShieldTM(250 mmtimes;4.6 mm，5mu;m);检测器为可变波长检测器(VWD);流动相：A 相为 20mmol/L 磷酸二氢钠水溶液(加 10 ml 四丁基氢氧化铵，制成1 000 ml，并用磷酸调pH=5.0)，B相为乙腈，梯度洗脱，流速：1.2 ml/min;检测波长：220 nm;进样量：20 mu;l;柱温：35 ℃。 　　2.3 检查方法 　　取对照溶液20 m