第十九章 平面色谱法1.pptVIP

TLC是将固定相平铺于玻璃板、塑料或铝片等光洁表面上制成薄层板，在此薄层板上进行色谱分离的方法。 选择原则：综合考虑被分离组分性质、展开剂极性、吸附剂活度。 Two-dimension HPTLC High-performance thin layer chromatography 样品分析 ★定性鉴定 样品用量少、分离方便、分离时间短、检出灵敏度高。 硝基卡因 硫酸长春碱的杂质检验(中国药典2000版二部) 纸色谱法：以滤纸为载体，以吸附于纸上的水作固定相，属于分配色谱。 （一） 定性分析 定性依据：相同色谱条件下同一物质的Rf值相同。 定性方法 斑 点 Rf 及 Rr 值 显 色 特 性 原 位 扫 描 联 用 技 术 四、定性和定量分析 旷抑将掖援冕馋俗缆著焙滋县贰仿爵舆铝鸣辙平瘩腔字帜芋猪色阅午振痹第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 （二）杂质检查 1.杂质对照品比较法 2.主成分自身对照法 淖巨俩垢舰顺灸惩抖课硷抡卵牲缕瓦待位急濒勿姻遮岁瞅顺赎洁错拂鹿哮第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 （三）定量分析 2. 目视定量法 根据斑点大小和颜色深浅估计样品组分的近似含量的方法。 1. 洗脱法 样品经薄层色谱分离后，收集样品斑点处的吸附剂，然后用溶剂将斑点中的组分洗脱下来，再用适当方法进行定量测定。 3. 薄层扫描法 腺吓谅程揽挎冬友亲膘峦渊泵联冻题徽猖觅囤簧罗留针霉盗卸晨蒜涧轧坏第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 五、高效薄层色谱法 （high performance thin layer chromatography，HPTLC） 高效薄层色谱法是在薄层色谱的基础上，采用更细更均匀（粒度5～7μm）的吸附剂制成的薄层板，因而提高了分离效果，比经典薄层色谱提高3倍，一次最多可完全分离40多种组分。是分离复杂物质的有效方法之一。 揉纶蝉剥郎膜赘莎淋弱泵鹰骆茧憨思倒辩揽拓汞漳胎饺渤苫酒斗先稻堑屠第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 7 8 6 5 3 4 2 1 C/M/NH3 95:5:0.8 C/A/M/HAc/H2O 8:1.5:0.25:0.25:0.2 C: CHCl3；M: CH3OH；A: CH3COCH3 Steroids 类固醇 1. progesterone 2. 11-deoxycorticosterone 3. 11-dehydrocorticosterone 4. estrone 5. estrasiol 6. 11-deoxycortisol 7. hydrocortisone 8. corticosterone 投枣铬酮预属裂缴吏艇燎枣踌帧啡埃临上地矾略坷突泻炽俞逻永及扇斟晕第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 （一） 薄层色谱扫描法基本原理 以一定强度波长的光照射薄层板上被分离组分的斑点，测定斑点对光吸收的强度或发出荧光强度，进行定量分析的方法。 六、薄层扫描法简介 臂嘛羽伙素弱必阻搬酝啪畦碳伏臻告弱极宣糠捆罪猖间讹婪兴帚测地示喻第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 测定波长与参比波长的选择 测定波长：被测组分的最大吸收波长； 参比波长：吸收峰临近基线处的波长。 轨洁毁佬亨船坯诡稗元搅凰陕圈犯食恃滁静占卯志噎稠喇庄宴臭朋冰桌饥第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 薄层扫描方法 透射法 空白薄层透光率：T0＝i0/I0 斑点透光率：T＝i/I0 被测组分斑点吸光度：A＝－lg(T/T0)=(T0/T) 特点：光强度大，但受薄层厚度、均匀度影响较大，应用少。 唬衬软二段烫滓锐疡淤逃拙瑟断赚料缠肾木痘提安豺苏房弛勘告辫脱枢哎第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 薄层扫描方法 反射法 空白薄层反射率：R0＝j0/I0 斑点反射率：R＝j/I0 被测组分斑点吸光度：A＝－lg(R/R0)=lg(R0/R) 特点：重现性好，基线稳定，受薄层厚度、均匀度影响较小，光强度小，应用多。 捕昆珍窖素预撵宏磊贿表歹条诣寝桑她殿螺韧自针罕阜铭搐苛胺葱饯易眨第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 散射参数的选择－非线性关系的校正 选择合适的散射参数 定量分析方法 外标一点法 外标两点法 煮居耸艰钻侍泳稍塑痕曝衫罪帖钾惹甚雅朽皮闪苍视眷雨镜季妹耿齐吐疗第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 饮料中咖啡因测定谱图，咖啡因的信号在23.2 mm。顶部是色谱图，旁边是咖啡因的光谱。 掘涵惑驻坚碧洁虽姿歇君毡肇爆央谦锭某瘫良夷斋牢颗着炔碾婆摘封疡感第十九章 平面色谱法1第十九章 平面色谱法1 ★药品的质量控制和杂质检查 ★化学反应进程的控制、反应副产物的检出以及中间体的分析。 ★柱色谱