第三章氨基酸.ppt

第三章 氨基酸 一、氨基酸的结构 二、 氨基酸的分类 修饰的氨基酸 (Modified amino acids) 三、氨基酸的一般物理性质 ① 能结晶，晶形多种多样； ② 熔点高(＞200℃)； ③ 味道各异； ④ 除甘氨酸外，均有旋光性，蛋白质中的氨 基酸均为L－型，细菌中有D－型氨基酸； ⑤ 在近紫外光区(220nm-300nm)，只有Tyr、 Phe和Trp三种氨基酸有光吸收能力，最大 吸收值在280nm左右； 四、氨基酸的两性解离 Glu是酸性氨基酸,其解离形式为: Lys是碱性氨基酸，其解离情况是： 依理可推得 pI=（pK2′+ pKR′）/2 =（8.95+10.53）/2 = 9.74 Handerson-Hasselbalch公式： 〔质子受体〕 pH=pK′+ lg 〔质子供体〕 氨基酸的甲醛滴定 由于甲醛能与氨基酸中的-NH2 作用形成-NHCH2OH、-N(CH2OH)2 等羟甲基衍生物，使氨基酸向解离出H＋ 的方向移动，表现为酸性增强，碱性减弱（约2～3个pH单位）。 五、氨基酸的化学反应 1. 与茚三酮的反应 氨基酸的α－氨基的反应 ⑴ 亚硝酸反应 （2）与酰化试剂反应 氨基酸的氨基与酰化试剂作用生成酰胺衍生物。 （3） 烃基化反应 在弱碱条件下，烃基试剂发生亲核反应，取代了-NH2的一个H。 3. α-羧基的反应 4. 氨基和羧基共同参与的反应 5. R基参加的反应 （1） 酪氨酸的酚基和组氨酸的咪唑基: Pauly反应 （2） 半胱氨酸的巯基： a 和碘乙酸反应 b 和各种金属形成络合物； c 和Ellman‘试剂反应，用于-SH的定量测定； d 巯基的氧化 （3） 胱氨酸的二硫键： 能被氧化剂(如过甲酸)及还原剂(如巯 基乙醇、二硫苏糖醇DTT)打开。 六、氨基酸的分析和分离 氨基酸分析、分离的基本方法是各种层析技术，包括柱层析、纸层析和薄层层析， 都是基于氨基酸的酸碱性或极性的不同达到分离的目的的。 分配层析： 1. 待分离的样品中的各组分彼此的分配系数不同， 这是先决条件； 2. 分配系数大的组分沿流动相移动的速度比分配系数小的组分快； 分配系数Kd＝ 有效分配系数Keff＝ 离子交换层析 以人工合成的高分子化合物(如苯乙烯－苯二乙烯树脂)做支持物，其上交联着可交换的阳离子或阴离子。 分离氨基酸混合物常用强酸型阳离子交换树脂： 用碱处理交换柱，树脂变成Na+型，调氨基酸混合物至pH2-3，使氨基酸变成阳离子，与Na+交换而挂在树脂上。 结合牢固程度取决于： 静电引力 (主) 疏水相互作用 (次) pH3时，静电引力大小： 碱性AA(R2+) ＞中性AA(R+) ＞酸性AA(R0) 洗脱顺序