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《生物化学简明教程》章节作业 第01章 蛋白质 20种常见氨基酸的名称及分类：丙氨酸（Ala）缬氨酸（Val）亮氨酸（Leu）异亮氨酸（Ile）脯氨酸（Pro）苯丙氨酸（Phe）色氨酸（Trp）蛋氨酸（Met）甘氨酸（Gly）丝氨酸（Ser）苏氨酸（Thr）半胱氨酸（Cys）?酪氨酸（Tyr）天冬酰胺（Asn）谷氨酰胺（Gln）天冬氨酸（Asp）谷氨酸（Glu）赖氨酸（Lys）精氨酸（Arg）组氨酸（His） 20种氨基酸按R基的可分为Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Trp、Met、Pro）和极性氨基酸（带正电Lys、碱Arg、His）、带负电（Asp、酸Glu）、不带电（其它）） 2、简述氨基酸茚三酮（一般脯氨酸例外）显色的原理和应用。 原理：茚三酮在弱酸溶液中与氨基酸加热,发生氧化、脱氨、脱羧作用。茚三酮水合物被还原,其还原物可与氨基酸加热分解产生的氨结合,再与另一分子茚三酮缩合成为蓝紫色化合物,称为罗曼紫 应用：是氨基酸的特异性化学反应，常用于氨基酸的定性、定量分析。产生CO2定量测体积从而测AA的量，产生的蓝紫色化合物在570nm波长比色，定量测AA含量。该颜色反应常用于AA纸层析、薄层层析、电泳等显色。脯氨酸例外不产生NH3，生成黄素化合物 3、氨基酸等电点的概念及计算。 在某一PH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶液ph称该氨基酸的等电点。pI=1/2（pKa1+PKa2） α-螺旋:蛋白质中常见的二级结构，肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状，一般都是右手螺旋结构，螺旋是靠链内维持的。白质的三级结构蛋白质的多肽链在各种二级结构的基础上再进一步盘曲或折迭形成具有一定规律的三维空间结构结构稳定主要靠次级键氢键、疏水键、盐键以及范德华力 5、蛋白质变性复性的本质以及变性因素。 蛋白质的变性：当蛋白质受到物理因素或化学因素的影响后，由次级键维持的高级结构受到破坏，分子内部结构发生变化，致使生物学性质、理化性质改变。（二级结构以上空间结构破坏） 变性因素：物理和化学因素两类。物理因素可以是加热、加压、脱水、搅拌、振荡、紫外线照射、超声波的作用等；化学因素有强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二烷基磺酸钠(SDS)等。在临床医学上，变性因素常被应用于消毒及灭菌。在变性条件不剧烈，变性蛋白质内部结构变化不大时，除去变性因素，在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性（renaturation）。 离子交换层析（Ion Exchange Chromatography简称为IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。6、8、9 6．由下列信息求八肽的序列。 （1）酸水解得 Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2Val。 （2）Sanger试剂处理得DNP-Ala。 （3）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和 Leu，Met，Phe，2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。 （4）溴化氰处理得 Ala，Arg，高丝氨酸内酯，Thr，2Val，和 Leu，Phe，当用Sanger试剂处理时，分别得DNP-Ala和DNP-Leu。 答：由（2）推出N末端为Ala；由（3）推出Val位于N端第四，Arg为第三，而Thr为第二；溴化氰裂解，得出N端第六位是Met，由于第七位是Leu，所以Phe为第八；由（4），第五为Val。所以八肽为：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。 8．当一种四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3种氨基酸；当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段；其中一片用LiBH4（下标）还原后再进行酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫（红）色产物的氨基酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？ 答：（1）四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val，证明N端为Val。 （2）LiBH4还原后再水解，水解液中有氨基乙醇，证明肽的C端为Gly。 （3）水解液中有在浓H2SO4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸，说明此氨基酸为Trp。说明C端为Gly－Trp… （4）根据胰蛋白酶的专一性，得知N端片段为Val－Arg（Lys）…，以（1）、（2）、（3）结果可知道四肽的顺序：N－Val－Arg（Lys）－Trp－Gly－C。 9．概述测定蛋白质一级结构的基本步骤。 答：（1）测定蛋白质中氨基酸组成。（2）蛋白质的N端和C端的测定。（3）应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白