自来水中细菌含量的测定.doc

微生物综合性、设计性实验论文 题目：自来水中细菌总数的测定 自来水中细菌总数的测定 【摘 要】 本实验应用平板菌落技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌种数仅是一种近似值。目前一般采。实验用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板，计数。按菌落计数方法进行计数，通过实验测得的菌数对照国家饮用水标准来判断水质。自来水的微生物学检验，特别是肠道细菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。国家饮用水标准（GB5749-85）规定，饮用水中大肠菌群数每升中不超过3个，细菌总数每毫升不超过100个。所谓细菌总数，指1毫升或1克检样中所含的细菌菌落的总数。水中细菌的数目也是判断水质的一个重要标准。本实验通过计算出水中的细菌总数， 通过实验得到：乳白色菌落不规则的分布在培养皿上，经计数，取其平均值得到，菌落数为 71，经计算得1 mL自来水中细菌总数为28 ，符合我国饮用水的标准。 【关键字】 自来水 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 平板菌落计数技术 乳白色菌落 前 言 水是微生物广泛分布的天然环境。各种天然水中常含一定数量的微生物。水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。水中的病原菌主要来自于人和动物的传染性排泄物。自来水指通过水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水必须符合国家生活饮用水卫生标准1］。细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分，培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1mL水样所含菌落的总数。本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。 应用平板计数技术测定水中细菌总数是用微生物测水质的常用方法。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。通过此方法我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。 3个，细菌总数每毫升不超过100个。所谓细菌总数，指1毫升或1克检样中所含的细菌菌落的总数。按菌落计数方法进行计数，得到如下结果：在显微镜下可观察到众多的菌落且种类繁多，取其平均值得到，菌落数为 65/mL，自来水中细菌总数为65/mL，符合国家饮用水标准。 一，仪器和材料 1.1 实验试剂 牛肉膏蛋白胨1mol/LNaOH溶液、1mol/L盐酸溶液、灭菌水 实验仪器 高压蒸气灭菌锅带玻璃塞瓶培养皿三角烧瓶天平麻绳量 筒pH试纸（pH5.59.0）牛皮纸管牛角匙棉花记号笔纱 布吸 管玻璃棒电热炉称量杯 水样的采取 先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再放开水龙头使水流5min后，以灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。 固体培养基的制作 牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下： 牛肉膏 3.0 g 蛋白胨 10.0 g 5.0 g 水 1000mLpH 7.4～7.6 将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH，直至PH达7.6。反之，用1mol/LHCL 进行调节。 高压蒸气灭菌 将内层锅去，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。 放回内层锅，并加入要灭菌的培养皿、试管、烧杯等物品（注意不要装得太挤，以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果）。 加盖，并将盖上的排气管插入内层的排气槽内，再2两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。 本实验用0.1MPa，121.5℃，20min灭菌。灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。