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知识回顾 1、果胶酶是果胶酶和 的总称。 2、果胶的基本单位 、 。 果胶甲酯酶 半乳糖醛酸 半乳糖醛酸甲酯 3、果胶水解的基本单位 。 半乳糖醛酸 4、果胶酶活性检测的指标 。 出汁率、浑浊度 5、果胶不溶于 ， 产生 。 酒精 白色絮状沉淀 知识结构 二、α-淀粉酶的固定化与淀粉水解作用的检测 一、固定化技术基础知识 实验6 α-淀粉酶的固定化 与淀粉水解作用的检测 催化效率高，低耗能、低污染。 易失活、难回收、不能被再次利用、产物难分离提纯。 直接使用酶的优缺点？ 优点？ 缺点？ 固定化技术基础知识 1、什么是酶的固定化技术？ 2、使用固定化酶的优点？ （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。 固定化技术基础知识 类型 优点 不足 直接使用酶 固定化酶 直接使用酶和固定化酶的优缺点 催化效率高 低耗能 低污染 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，难分离 在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 难以一次性固定化多种酶 固定化技术基础知识 包埋法 交联法 吸附法 包括吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等。 3、酶固定化的方法？ 共价偶联法 固定化技术基础知识 二、酶固定化的操作？ a-淀粉酶的固定化 （1）在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。 （4）用10倍体积的蒸馏水洗涤此层析柱。 （2） 再加入 5g石英砂，不时搅拌。 （3） 30分钟后装入层析柱中。 用于吸附淀粉酶 保证充分吸附 流速控制为1ml/min。 除去未吸附的游离淀粉酶 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 流速适当慢些 吸附 装柱 洗柱 固定化装置—层析柱 a-淀粉酶的固定化 实验原理？ α-淀粉酶 β-淀粉酶 糖化淀粉酶 淀 粉 糊 精 麦 芽 糖 葡 萄 糖 三、淀粉水解作用的检测 一定浓度的淀粉溶液经过固定化的α-淀粉酶催化后，使流出液加入________指示液后呈_____色，说明有糊精生成。 遇碘后的显色反应？ KI-I2 红 最适温度、pH 值？ 实验步骤？ 三、淀粉水解作用的检测 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 筛板 淀粉 收集流出液，鉴定 实验步骤？ 三、淀粉水解作用的检测 淀粉溶解 过柱 检测 固定化酶的保存 实验步骤注意事项？ 三、淀粉水解作用的检测 1、控制滴灌流速。 2、KI-I2 溶液不要加入太多。 使淀粉和淀粉酶充分接触、反应。 以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。 实验现象？ 三、淀粉水解作用的检测 1、2mL水 + 1~2滴KI-I2溶液 2、2mL淀粉液 + 1~2滴KI-I2溶液 3、2mL淀粉滤液 + 1~2滴KI-I2溶液 4、2mL淀粉滤液 + 1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍 11 6