实验《检测生物组织中的糖类、蛋白质、脂肪》课件.pptVIP

实验原理 （1）鉴定试验设计的理念： 某些化学试剂 + 生物组织中有关有机物 产生特定的颜色反应 （2）具体原理： 1、可溶性还原性糖+斐林试剂 砖红色沉淀 2、脂肪小颗粒+苏丹Ⅲ染液 橘黄色小颗粒 3、蛋白质+双缩脲试剂 紫色反应 斐林试剂 苏丹Ⅲ 橘黄色 红色 砖红色沉淀 紫色 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 鉴定物质 试剂 实验现象 还原性糖 脂肪 蛋白质 淀粉 碘 蓝色 实验原理 实验目的 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。 材料用具 1、实验材料：苹果或梨匀浆、花生种子、蛋清稀释液。 2、用具：双面刀片、试管、试管架、试管夹、大小烧杯、小量筒、滴管、水浴锅、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜。 3、试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液） 、苏丹Ⅲ染液、双缩脲试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.01g/mL的CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液和蒸馏水。 方法步骤 1．实验材料、仪器和试剂的选择。 2．设计记录表格，记录预测结果。 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察； (2)脂肪的检测和观察； (3)蛋白质的检测和观察； 选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对 显色的干扰)，苹果、梨最好 。 （ 1 ）可溶性还原糖的检测和观察 制备组织样液： 制浆：去皮、切块、研磨， 过滤：（用单层纱布） 取液：（２mL） 显色反应 现象： (用前混匀) 50～65.C水浴 加热2min 还原糖的检测和观察： 还原糖的检测结果 取材：花生种子（浸泡３－４h） 制片： ①滴一滴清水在载玻片上 ③在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液2 － 3滴，染色 ２－３min ④滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 (多余的苏丹Ⅲ ) ⑤吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片 显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察 现象： 有被染成橘黄色的脂肪微粒 （ 2 ）脂肪的检测和观察 ②将花生横切后轻轻压在载玻片上的清水处 脂肪的检测结果 选材与制备 组织样液： 鸡蛋蛋清稀释液 显色反应 现象： 无色 紫色或紫红色 (创设碱性条件) (提供Cu2+) （ 3 ）蛋白质的检测和观察 蛋白质的检测结果 取材：马铃薯匀浆 检测： 碘液2滴 现象： 摇匀后变成蓝色 （ 4 ）蛋白质的检测和观察 1.你的预测与实验结果是否一致？ 2.小组间交流实验结果。你有什么发现？ 3.全班共检测了多少种生物材料？这些生 物材料中有机化合物的种类、含量一样吗？ 这对我们选择食物有什么启发？ 讨论 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？ 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 深化 比较项目 试剂及成分 原理 溶液浓度 方法 加热与否 结果 可溶还原糖的鉴定 斐林试剂NaOH和CuSO4 砖红色沉淀 蛋白质的鉴定 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 溶液呈紫色 4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？ 新配制的 Cu(OH)2 溶液 在碱性 环境下 的Cu2+ NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.05g/mL NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.01g/mL 先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合， 而后立即使用。 先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量) 水浴 加热 不 需 要 5、实验的材料的选择和处理有什么要求？ 材料的选择 材料的处理 还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定 含糖高，颜色为 白色的植物组织， 如苹果和梨 富含脂肪的种子 ，如花生 浸泡3~4小时 / 蛋白质的鉴定 富含蛋白质的 黄豆或鸡蛋清 黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释 淀粉的鉴定 马铃薯 / 各种可供实验的材料 梨 黄桃 胡萝卜 黄豆 花生种子 小麦种子 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定?