生物《da的粗提取和分离》(课件)重点.ppt

①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得　DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得　DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑥除去含DNA的滤液中的杂质 湖南长郡卫星远程学校 2015年上学期 制作 05 讨论1：生物体的遗传物质是什么？ 讨论2：真核生物的遗传物质存在于哪里？ 讨论1：生物体的遗传物质是什么？ 讨论2：真核生物的遗传物质存在于哪里？ 讨论1：生物体的遗传物质是什么？ 讨论3：怎样才能将真核细胞内的遗传物 质分离来？ 基本知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 一、DNA的溶解性 基本知识 2mol/L浓度可使DNA溶解； 0.14mol/L浓度可使DNA析出。 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 一、DNA的溶解性 二、酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却 不能溶于酒精； 三、蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA 没有影响 四、大多数蛋白质不能忍受60－80℃的 高温，而DNA在80℃以上才会变性 五、洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去 除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响 DNA的鉴定 ①DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 ②甲基绿（绿色） (一)实验材料的选取： 用什么材料提取DNA？为什么？ 实验设计 (一)实验材料的选取： 鸡血细胞做实验材料。原因： 1. 鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得 2. 鸡血细胞极易吸水胀破 3. 植物细胞外有细胞壁，其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。 (二)破碎细胞，获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？ 2. 若是植物细胞，如何获取DNA滤液？ (二)破碎细胞，获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？ 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解 会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等 (三)去除滤液中的杂质 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ (三)去除滤液中的杂质 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ 可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。 (三)去除滤液中的杂质 根据DNA的理化性质，可以用哪些方法来去除滤液中的杂质？ (三)去除滤液中的杂质 　　为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用) (三)去除滤液中的杂质 　　为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用) 　　用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中的杂质。因此，反复溶解与析出DNA，就能除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 析出： 滤液+同体积95%冷却酒精 　白色丝状物 (四)DNA的析出 DNA＋二苯胺 蓝色物 沸水浴 (五)DNA的鉴定 如何鉴定？对比反应是为了证明什么？原理？ 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 操作提示 　　2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 操作提示 　　2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 　　3. 二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 操作提示 试 验 ( 播放视频 ) ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝